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Fusobacterium nucleatum 263の細胞表面抗原に対するモノクローナル抗体（mAb）は、マウス骨髄腫細胞（p3-NSI/1-AG4-1）とFの全細胞と免疫化されたBALB/Cマウスの脾細胞の融合により得られました。。このスクリーニング手順に基づいて12のmAbが選択され、そのうち7つはF. nucleatum 263と特異的に反応しました。（臨床分離株）およびFusobacterium russii ATCC 25533と交差しました。選択したmAbは、無傷の細菌細胞の懸濁液を伴う吸収実験によってさらに特徴付けられ、上皮の残留結合活性はELISAで決定されました。mAbsが同じまたは異なるエピトープと反応したかどうかを判断するために、mabのペアをELISAでチェッカーボードで独立して反応しました。反応性の相加的または非加法性が決定されました。競合阻害アッセイは、標識および選択された1つの選択された非標識MABを使用して実行されました。これらの実験の結果は、F。nucleatumの特定の抗原と反応し、F。nucleatumおよびF. rusisiiの3つの株と交差反応性抗原を共有した選択されたMAB間のいくつかのエピトープ共有を示唆しました。
Fusobacterium nucleatum 263の細胞表面抗原に対するモノクローナル抗体（mAb）は、マウス骨髄腫細胞（p3-NSI/1-AG4-1）とFの全細胞と免疫化されたBALB/Cマウスの脾細胞の融合により得られました。。このスクリーニング手順に基づいて12のmAbが選択され、そのうち7つはF. nucleatum 263と特異的に反応しました。（臨床分離株）およびFusobacterium russii ATCC 25533と交差しました。選択したmAbは、無傷の細菌細胞の懸濁液を伴う吸収実験によってさらに特徴付けられ、上皮の残留結合活性はELISAで決定されました。mAbsが同じまたは異なるエピトープと反応したかどうかを判断するために、mabのペアをELISAでチェッカーボードで独立して反応しました。反応性の相加的または非加法性が決定されました。競合阻害アッセイは、標識および選択された1つの選択された非標識MABを使用して実行されました。これらの実験の結果は、F。nucleatumの特定の抗原と反応し、F。nucleatumおよびF. rusisiiの3つの株と交差反応性抗原を共有した選択されたMAB間のいくつかのエピトープ共有を示唆しました。
Monoclonal antibodies (MAbs) against the cell surface antigens of Fusobacterium nucleatum 263 were obtained by fusion of murine myeloma cells (P3-NSI/1-Ag4-1) with the splenocytes of BALB/c mice immunized with whole cells of F. nucleatum 263. Screening was performed using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) against the immunizing strain, F. nucleatum 263. Further selection was done using a bacterial panel consisting of Bacteroides, Actinomyces, Streptococcus, Fusobacterium, and Escherichia species. Twelve MAbs were selected on the basis of this screening procedure, seven of which reacted specifically with F. nucleatum 263. Two reacted with F. nucleatum 263 and ATCC 25586, and three reacted with F. nucleatum 263, ATCC 25586, and UQD-003 (a clinical isolate) and also cross-reacted with Fusobacterium russii ATCC 25533. The selected MAbs were then further characterized by absorption experiments with suspensions of intact whole bacterial cells, and the residual binding activity of the supernatants was determined in an ELISA. To determine whether the MAbs reacted with the same or different epitopes, pairs of MAbs were reacted together and independently in a checkerboard manner in an ELISA. The additive or nonadditive nature of the reactivity was determined. A competitive inhibition assay was performed using one labeled and selected unlabeled MAbs. The results of these experiments suggested some epitope sharing among the selected MAbs that reacted with a specific antigen on F. nucleatum and also shared cross-reactive antigens with the three strains of F. nucleatum and F. russii.
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