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理論的根拠：Mycobacterium Avium complex（MAC）は、世界的な発生率の増加を示す非菌性マイコバクテリア肺疾患（NTM-PD）の最も一般的な原因です。臨床診療で日常的に使用されている現在の微生物学的方法は感度がなく、長い遅延があり、診断と治療の開始と評価の遅延につながります。血清中のMAC細胞のないDNA（MAC-CFDNA）レベルを測定するCRISPRベースのアッセイは、MAC感染を検出し、抗菌薬治療に対する反応を監視するための迅速な手段を提供する可能性があります。 目的：MAC感染の検出のためのCRISPR-MACアッセイを開発および最適化し、2つのMAC疾患コホートにおけるその診断および予後性能を評価する。 方法：MAC-CFDNA血清レベルは、MAC疾患と診断された個人またはNTM-PDまたはNTM陽性の芽培養の既往がない気管支またはCOPD診断を受けた個人で測定されました。診断パフォーマンスは、2つのコホートからの治療前の血清で分析されました。MAC-PD治療中の血清MAC-CFDNAの変化は、マクロライドベースのマルチラグレジメンを投与されたMAC-PD患者のサブセットで評価されました。 測定と主な結果：CRISPR-MACアッセイは、MAC-PDでMAC-CFDNAを検出し、97.6％（91.6-99.7％）の感度と97.6％（91.5-99.7％）の特異性を全体で検出しました。血清MAC-CFDNAレベルは、MAC培養変換を実証したMAC-PD患者のMAC指向治療開始後に著しく低下しました。 結論：この研究は、MAC感染を迅速に検出し、治療に対する反応を監視するための血清ベースのCRISPR-MACアッセイの有用性に関する予備的な証拠を提供します。
理論的根拠：Mycobacterium Avium complex（MAC）は、世界的な発生率の増加を示す非菌性マイコバクテリア肺疾患（NTM-PD）の最も一般的な原因です。臨床診療で日常的に使用されている現在の微生物学的方法は感度がなく、長い遅延があり、診断と治療の開始と評価の遅延につながります。血清中のMAC細胞のないDNA（MAC-CFDNA）レベルを測定するCRISPRベースのアッセイは、MAC感染を検出し、抗菌薬治療に対する反応を監視するための迅速な手段を提供する可能性があります。 目的：MAC感染の検出のためのCRISPR-MACアッセイを開発および最適化し、2つのMAC疾患コホートにおけるその診断および予後性能を評価する。 方法：MAC-CFDNA血清レベルは、MAC疾患と診断された個人またはNTM-PDまたはNTM陽性の芽培養の既往がない気管支またはCOPD診断を受けた個人で測定されました。診断パフォーマンスは、2つのコホートからの治療前の血清で分析されました。MAC-PD治療中の血清MAC-CFDNAの変化は、マクロライドベースのマルチラグレジメンを投与されたMAC-PD患者のサブセットで評価されました。 測定と主な結果：CRISPR-MACアッセイは、MAC-PDでMAC-CFDNAを検出し、97.6％（91.6-99.7％）の感度と97.6％（91.5-99.7％）の特異性を全体で検出しました。血清MAC-CFDNAレベルは、MAC培養変換を実証したMAC-PD患者のMAC指向治療開始後に著しく低下しました。 結論：この研究は、MAC感染を迅速に検出し、治療に対する反応を監視するための血清ベースのCRISPR-MACアッセイの有用性に関する予備的な証拠を提供します。
RATIONALE: Mycobacterium avium complex (MAC) is the most common cause of nontuberculous mycobacterial pulmonary disease (NTM-PD), which exhibits increasing global incidence. Current microbiologic methods routinely used in clinical practice lack sensitivity and have long latencies, leading to delays in diagnosis and treatment initiation and evaluation. A CRISPR-based assay that measures MAC cell-free DNA (MAC-cfDNA) levels in serum could provide a rapid means to detect MAC infection and monitor response to antimicrobial treatment. OBJECTIVES: To develop and optimize a CRISPR-MAC assay for MAC infection detection and to evaluate its diagnostic and prognostic performance in two MAC disease cohorts. METHODS: MAC-cfDNA serum levels were measured in individuals diagnosed with MAC disease or who had bronchiectasis or COPD diagnoses without a history of NTM-PD or NTM-positive sputum cultures. Diagnostic performance was analyzed with pre-treatment serum from two cohorts. Serum MAC-cfDNA changes during MAC-PD treatment were evaluated in a subset of MAC-PD patients who received macrolide-based multi-drug regimens. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: CRISPR-MAC assay detected MAC-cfDNA in MAC-PD with 97.6% (91.6 - 99.7%) sensitivity and 97.6% (91.5 - 99.7%) specificity overall. Serum MAC-cfDNA levels markedly decreased after MAC-directed treatment initiation in MAC-PD patients that demonstrated MAC culture conversion. CONCLUSIONS: This study provides preliminary evidence for the utility of a serum-based CRISPR-MAC assay to rapidly detect MAC infection and monitor their response to treatment.
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