Gタンパク質共役エストロゲン受容体（GPER）/GPR30は、β1-アドレナリン受容体、膜関連グアニル酸キナーゼ（MAGUK）足場タンパク質、およびプロテインキナーゼAアンカータンパク質（AKAP）5と複合体を形成します。

Gタンパク質共役エストロゲン受容体（GPER）とも呼ばれるGタンパク質共役受容体30（GPR30）、およびβ1-アドレナリン受容体（β1AR）は、乳癌の進行に関与するGタンパク質共役受容体（GPCR）です。両方の受容体には、C末端尾部にPSD-95/discs-large/ZO-1相同性（PDZ）モチーフが含まれており、それを介して膜関連のグアニル酸キナーゼ（MAGUK）足場タンパク質と相互作用し、タンパク質キナーゼと相互作用します。固定タンパク質（AKAP）5。GPR30は、β1ARを介したcAMP産生を構成的かつPDZ依存的に阻害します。この阻害は、これらの受容体の血漿膜複合体の結果であると仮定しました。共免疫沈降、共焦点免疫蛍光顕微鏡、および生体発光共鳴エネルギー移動（BRET）を使用して、GPR30とβ1ARがHEK293で一時的に発現した場合、血漿膜複合体の近接していることを示します。GPR30 C末端PDZモチーフ（-SSAV）を削除しても、受容体複合体を妨害することはなく、複合体がPDZ依存性ではないことを示しています。MCF7乳がん細胞は、原形質膜でGPR30、β1AR、MAGUK、およびAKAP5を発現し、CO免疫沈降により、これらのタンパク質はネイティブ条件下でも近接して存在することが明らかになりました。さらに、MCF7細胞におけるGPR30の発現は、β1ARを介したcAMP産生を構成的かつPDZ依存的に阻害します。AKAP5はまた、β1ARを介したcAMP産生を阻害します。これは、GPR30が促進した阻害に加えていません。これらの結果は、GPR30およびβ1ARがMCF7細胞でPDZ非依存性複合体を形成することを主張しています。これにより、GPR30はMAGUKおよびAKAP5との受容体相互作用を介してβ1ARシグナル伝達を構成的かつPDZ依存的に阻害します。

G protein-coupled receptor 30 (GPR30), also named G protein-coupled estrogen receptor (GPER), and the β1-adrenergic receptor (β1AR) are G protein-coupled receptors (GPCR) that are implicated in breast cancer progression. Both receptors contain PSD-95/Discs-large/ZO-1 homology (PDZ) motifs in their C-terminal tails through which they interact in the plasma membrane with membrane-associated guanylate kinase (MAGUK) scaffold proteins, and in turn protein kinase A anchoring protein (AKAP) 5. GPR30 constitutively and PDZ-dependently inhibits β1AR-mediated cAMP production. We hypothesized that this inhibition is a consequence of a plasma membrane complex of these receptors. Using co-immunoprecipitation, confocal immunofluorescence microscopy, and bioluminescence resonance energy transfer (BRET), we show that GPR30 and β1AR reside in close proximity in a plasma membrane complex when transiently expressed in HEK293. Deleting the GPR30 C-terminal PDZ motif (-SSAV) does not interfere with the receptor complex, indicating that the complex is not PDZ-dependent. MCF7 breast cancer cells express GPR30, β1AR, MAGUKs, and AKAP5 in the plasma membrane, and co-immunoprecipitation revealed that these proteins exist in close proximity also under native conditions. Furthermore, expression of GPR30 in MCF7 cells constitutively and PDZ-dependently inhibits β1AR-mediated cAMP production. AKAP5 also inhibits β1AR-mediated cAMP production, which is not additive with GPR30-promoted inhibition. These results argue that GPR30 and β1AR form a PDZ-independent complex in MCF7 cells through which GPR30 constitutively and PDZ-dependently inhibits β1AR signaling via receptor interaction with MAGUKs and AKAP5.