全身性エリテマトーデスにおける型インターフェロンシグナル伝達におけるRhoA GTPase調節の潜在的な役割

目的：全身性エリテマトーデス（SLE）は、I型インターフェロン（IFN）経路の異常な活性化を特徴とする自己免疫障害であり、組織の炎症と臓器損傷をもたらします。SLEの治療のためのGTPaseシグナル伝達を標的とするための潜在的な基盤を提供するために、I型IFN活性化経路におけるRhoA GTPaseの役割を調査しました。 方法：SLE患者および健康なコントロールの末梢血単核細胞（PBMC）から総RNAを抽出し、RhoAおよびIFN刺激遺伝子のmRNA発現レベルをSYBR緑色の定量逆転写酵素 - ポリメラーゼ鎖反応により測定しました。IFN-A刺激応答要素（ISRE） - ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイとウエスタンブロッティングを実施して、RHOAの生物学的機能を評価しました。酵素結合免疫測定法（ELISA）は、C-X-Cモチーフケモカインリガンド10（CXCL10）タンパク質発現を測定しました。 結果：我々の研究は、SLE被験者のPBMCにおけるRHOAの発現が健康なコントロールよりも有意に高く、タイプI IFNスコアと型と相関しており、I IFN刺激遺伝子（ISGS）の発現レベルと正の相関があることを示しています。RHOAおよびRHOA/ROCK阻害剤Y27632のsiRNA媒介ノックダウンY27632は、I型IFN誘導ISREの活性、転写1（STAT-1）リン酸化のシグナルトランスデューサーと活性化因子、およびCXCL10および2'-5の発現を減少させました。' - オリゴアデニル酸シンテターゼ1（OAS1）。最後に、Y27632がSLE患者のPBMCにおけるOAS1およびCXCL10発現レベルを大幅にダウンレギュレートできることを確認しました。 結論：私たちの研究は、RhoAがI型IFN応答経路の活性化を積極的に調節することを示しています。RhoAの発現レベルを低下させると、I型IFNシステムの異常な活性化が阻害され、RhoA/ROCK阻害剤Y27632はSLE PBMCでの異常なタイプI IFNシグナル伝達を減少させ、SLEの治療のためにRhoA GTPaseを標的とする可能性を示唆しています。

OBJECTIVE: Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disorder characterized by abnormal activation of the type I interferon (IFN) pathway, which results in tissue inflammation and organ damage. We explored the role of the RhoA GTPase in the type I IFN activation pathway to provide a potential basis for targeting GTPase signaling for the treatment of SLE. METHODS: Total RNA was extracted from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of SLE patients and healthy controls, and the mRNA expression levels of RhoA and IFN-stimulated genes were measured by SYBR Green quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction. IFN-a-stimulated response element (ISRE)-luciferase reporter gene assays and Western blotting were conducted to assess the biologic function of RhoA. An enzyme-linked immunoassay (ELISA) measured C-X-C motif chemokine ligand 10 (CXCL10) protein expression. RESULTS: Our studies demonstrate that the expression of RhoA in the PBMCs of SLE subjects was significantly higher than in healthy controls and positively correlated with type I IFN scores and type I IFN-stimulated gene (ISGs) expression levels. SiRNA-mediated knockdown of RhoA and the RhoA/ROCK inhibitor Y27632 reduced the activity of the type I IFN-induced ISRE, the signal transducer and activator of transcription 1 (STAT-1) phosphorylation, and the expression of CXCL10 and 2'-5'-oligoadenylate synthetase 1 (OAS1). Finally, we verified that Y27632 could significantly down-regulate the OAS1 and CXCL10 expression levels in the PBMCs of SLE patients. CONCLUSION: Our study shows that RhoA positively regulates the activation of the type I IFN response pathway. Reducing the expression level of RhoA inhibits the abnormal activation of the type I IFN system, and the RhoA/ROCK inhibitor Y27632 decreases aberrant type I IFN signaling in SLE PBMCs, suggesting the possibility of targeting the RhoA GTPase for the treatment of SLE.