マウスおよびヒト肝臓組織のミトコンドリアサイズを測定するためのプロトコル

ミトコンドリアの動的プロセスは、細胞生存率、代謝活性、およびミトコンドリアの健康に重要です。ここでは、ImageJの免疫蛍光染色、共焦点イメージング、および分析を介してミトコンドリアサイズを測定するためのプロトコルを提示します。組織処理の手順、抗原回収、統合免疫蛍光アッセイを使用したミトコンドリア染色、およびマウスおよびヒト肝組織の各ミトコンドリアサイズを測定するコンピューター化された画像分析について説明します。このプロトコルは、一次細胞の調製のための組織サンプルの体積と処理時間を減らします。このプロトコルの使用と実行の詳細については、Pearah et al.1を参照してください。

Mitochondrial dynamic process is important for cell viability, metabolic activity, and mitochondria health. Here, we present a protocol for measuring mitochondrial size through immunofluorescence staining, confocal imaging, and analysis in ImageJ. We describe the steps for tissue processing, antigen retrieval, mitochondrial staining using an integrating immunofluorescence assay, and computerized image analysis to measure each mitochondrial size in mouse and human liver tissues. This protocol reduces tissue sample volume and processing time for the preparation of primary cells. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Pearah et al.1.