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Brain sciences2024Jan22Vol.14issue(1)

紫外線表面励起(Muse)による顕微鏡検査の神経病理学的応用:ヒト原発性および転移性脳腫瘍の一致研究

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

従来の組織学と光学顕微鏡検査では、ホルマリン固定の複数のステップ、パラフィン埋め込み、およびセクショニングが必要です。病理学的診断のための画像を生成するために、紫外線表面励起(MUS)を使用した顕微鏡検査は、組織のカット表面でUV励起を介して動作し、高解像度の画像を生成することで動作します。組織を修正またはセクションの必要性、および下流の分子検査に使用できる可能性があります。ここでは、神経病理学的サンプルのMUSE顕微鏡検査の使用と適合性に関する最初の研究を提示します。MUSE画像は、原発性および転移性脳腫瘍生検サンプルの外科生検サンプル(n = 27)から生成され、診断、腫瘍グレード、および細胞特徴の盲検評価が対応するヘマトキシリンおよびエオシン(H&E)画像と比較されました。その後、ミューズ処理されたサンプルのセットがエクソームと標的シーケンスを受け、高品質のメトリックを新鮮な凍結標本のメトリックと比較しました。診断の精度は比較的高く、このコホートのためにDNAとRNAの完全性が保存されているように見えました。これは、Museが、迅速かつサンプルスパリングベースで、およびその後のDNAおよびRNAの分子分析のために、高品質の診断グレードの組織学的画像を生成する信頼できる方法である可能性があることを示唆しています。

従来の組織学と光学顕微鏡検査では、ホルマリン固定の複数のステップ、パラフィン埋め込み、およびセクショニングが必要です。病理学的診断のための画像を生成するために、紫外線表面励起(MUS)を使用した顕微鏡検査は、組織のカット表面でUV励起を介して動作し、高解像度の画像を生成することで動作します。組織を修正またはセクションの必要性、および下流の分子検査に使用できる可能性があります。ここでは、神経病理学的サンプルのMUSE顕微鏡検査の使用と適合性に関する最初の研究を提示します。MUSE画像は、原発性および転移性脳腫瘍生検サンプルの外科生検サンプル(n = 27)から生成され、診断、腫瘍グレード、および細胞特徴の盲検評価が対応するヘマトキシリンおよびエオシン(H&E)画像と比較されました。その後、ミューズ処理されたサンプルのセットがエクソームと標的シーケンスを受け、高品質のメトリックを新鮮な凍結標本のメトリックと比較しました。診断の精度は比較的高く、このコホートのためにDNAとRNAの完全性が保存されているように見えました。これは、Museが、迅速かつサンプルスパリングベースで、およびその後のDNAおよびRNAの分子分析のために、高品質の診断グレードの組織学的画像を生成する信頼できる方法である可能性があることを示唆しています。

Whereas traditional histology and light microscopy require multiple steps of formalin fixation, paraffin embedding, and sectioning to generate images for pathologic diagnosis, Microscopy using Ultraviolet Surface Excitation (MUSE) operates through UV excitation on the cut surface of tissue, generating images of high resolution without the need to fix or section tissue and allowing for potential use for downstream molecular tests. Here, we present the first study of the use and suitability of MUSE microscopy for neuropathological samples. MUSE images were generated from surgical biopsy samples of primary and metastatic brain tumor biopsy samples (n = 27), and blinded assessments of diagnoses, tumor grades, and cellular features were compared to corresponding hematoxylin and eosin (H&E) images. A set of MUSE-treated samples subsequently underwent exome and targeted sequencing, and quality metrics were compared to those from fresh frozen specimens. Diagnostic accuracy was relatively high, and DNA and RNA integrity appeared to be preserved for this cohort. This suggests that MUSE may be a reliable method of generating high-quality diagnostic-grade histologic images for neuropathology on a rapid and sample-sparing basis and for subsequent molecular analysis of DNA and RNA.

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