カーエンジニアリングリンパ球の持続性は、FASリガンド/FAS自動調節回路によって支配されています

キメラ抗原受容体（CAR）エンジニアリングTおよびNK細胞は、B細胞悪性腫瘍の耐久性のある寛解を引き起こす可能性があります。しかし、限られた持続性は、多くの患者におけるこれらの治療の潜在能力を最大限に抑えます。FASリガンド（FAS-L）/FAS経路は、自然に発生するリンパ球の恒常性を支配しますが、どの細胞が患者にFAS-Lを発現するか、およびこれらのソースがCARの持続性を損なうかどうかについての知識は不完全なままです。ここでは、FASLGをコードする遺伝子を発現する細胞サブセットを特定するために、多様な癌タイプの単一細胞アトラスを構築しました。FASLGは主に内因性T細胞、NK細胞、およびCAR-T細胞に限定されていることを発見しましたが、腫瘍および間質細胞は最小限のFASLGを発現します。CAR-T/NK細胞の生存がFAS-Lを介して調節されるかどうかを確立するために、FAS優性ネガティブ受容体（ΔFAS）の有無にかかわらず修飾されたリンパ球を使用して競合フィットネスアッセイを実施しました。養子移入後、ΔFAS発現CAR-TおよびCAR-NK細胞は複数の組織で濃縮されました。対照的に、FASLGは、自動車を介した腫瘍殺害に不可欠でした。複数のモデルでは、CAR-TとCAR-NKによるΔFASの共発現は、CAR細胞のみと比較して抗腫瘍の有効性を強化しました。一緒に、これらの発見は、CARエンジニアリングリンパ球の持続性がFAS-L/FASの自動調節回路によって支配されていることを明らかにしています。

Chimeric antigen receptor (CAR)-engineered T and NK cells can cause durable remission of B-cell malignancies; however, limited persistence restrains the full potential of these therapies in many patients. The FAS ligand (FAS-L)/FAS pathway governs naturally-occurring lymphocyte homeostasis, yet knowledge of which cells express FAS-L in patients and whether these sources compromise CAR persistence remains incomplete. Here, we constructed a single-cell atlas of diverse cancer types to identify cellular subsets expressing FASLG , the gene encoding FAS-L. We discovered that FASLG is limited primarily to endogenous T cells, NK cells, and CAR-T cells while tumor and stromal cells express minimal FASLG . To establish whether CAR-T/NK cell survival is regulated through FAS-L, we performed competitive fitness assays using lymphocytes modified with or without a FAS dominant negative receptor (ΔFAS). Following adoptive transfer, ΔFAS-expressing CAR-T and CAR-NK cells became enriched across multiple tissues, a phenomenon that mechanistically was reverted through FASLG knockout. By contrast, FASLG was dispensable for CAR-mediated tumor killing. In multiple models, ΔFAS co-expression by CAR-T and CAR-NK enhanced antitumor efficacy compared with CAR cells alone. Together, these findings reveal that CAR-engineered lymphocyte persistence is governed by a FAS-L/FAS auto-regulatory circuit.