Tanshinone IIAは、KDM1Aを介してSLC7A11のPIAS4を介したSUMOYlationを調節することにより、SLC7A11を不安定にし、乳がんのフェロプトーシスを促進します

はじめに：乳がん（BC）は、不利な予後の女性で最も一般的な悪性腫瘍です。 目的：Tanshinone IIA（Tan IIA）はBCの進行を阻害しますが、基礎となるメカニズムはほとんど定義されていません。 方法：TAN IIAの細胞毒性は、CCK-8およびLDHアッセイによって評価されました。フェロプトーシスは、MDA、Fe2+、脂質ROS、およびGSHのレベルによって監視されました。IHCおよびウエスタンブロットは、SLC7A11、PIAS4、KDM1Aおよびその他の重要な分子の局在と発現を検出するために採用されました。SLC7A11のSUMOYLationは、NIビーズのプルダウンアッセイとCO-IPによって検出されました。ルシフェラーゼとチップアッセイは、KDM1AとPIAS4プロモーターの間の直接的な関連を検出するために使用されました。BC細胞の増殖性および転移特性は、それぞれコロニー形成、CCK-8、およびトランスウェルアッセイによって評価されました。in vitro所見は、異種移植片および肺転移モデルで検証されました。 結果：Tan IIAは、BC細胞でSLC7A11を抑制することにより、フェロプトーシスを促進しました。PIAS4またはKDM1Aのサイレンシングは、BCの細胞増殖と転移を阻害しました。機械的には、PIAS4はSLC7A11への直接結合を介してSLC7A11のSUMOYlationを促進し、KDM1AはPIAS4の転写活性化因子として作用しました。機能的研究により、Tan IIAがKDM1A発現を減少させ、したがってPIAS4発現が転写的に抑制されることがさらに明らかになりました。SLC7A11のPIAS4依存性のSUMOYLationの阻害は、フェロプト症をさらに誘発し、それによりBCの増殖と転移を阻害しました。 結論：TAN IIAは、フェロプトーシスを促進し、KDM1A/PIAS4/SLC7A11軸を抑制することにより、腫瘍の成長と転移を阻害しました。

INTRODUCTION: Breast cancer (BC) is the most common malignancy in women with unfavorite prognosis. OBJECTIVES: Tanshinone IIA (Tan IIA) inhibits BC progression, however, the underlying mechanism remains largely undefined. METHODS: The cytotoxicity of Tan IIA was assessed by CCK-8 and LDH assays. Ferroptosis was monitored by the level of MDA, Fe2+, lipid ROS and GSH. IHC and western blot were employed to detect the localization and expression of SLC7A11, PIAS4, KDM1A and other key molecules. The SUMOylation of SLC7A11 was detected by Ni-beads pull-down assay and co-IP. Luciferase and ChIP assays were employed to detect the direct association between KDM1A and PIAS4 promoter. The proliferative and metastatic properties of BC cells were assessed by colony formation, CCK-8 and Transwell assays, respectively. The in vitro findings were verified in xenograft and lung metastasis models. RESULTS: Tan IIA promoted ferroptosis by suppressing SLC7A11 in BC cells. Silencing of PIAS4 or KDM1A inhibited cell growth and metastasis in BC. Mechanistically, PIAS4 facilitated the SUMOylation of SLC7A11 via direct binding to SLC7A11, and KDM1A acted as a transcriptional activator of PIAS4. Functional studies further revealed that Tan IIA decreased KDM1A expression, thus suppressing PIAS4 expression transcriptionally. The inhibition of PIAS4-dependent SUMOylation of SLC7A11 further induced ferroptosis, thereby inhibiting proliferation and metastasis in BC. CONCLUSION: Tan IIA promoted ferroptosis and inhibited tumor growth and metastasis via suppressing KDM1A/PIAS4/SLC7A11 axis.