A549非小細胞肺癌細胞株に対するmiRNA 200-C-3pの腫瘍抑制効果は、プログラムされた細胞死リガンド1のダウンレギュレーションに関連しています。免疫チェックポイントメカニズム

miRNA 200-c-3pは、腫瘍抑制であろうと促進であろうと、さまざまな腫瘍タイプでさまざまな機能を備えています。非小細胞肺癌（NSCLC）におけるその機能の包括的な評価と抗腫瘍免疫応答への影響は、これまで宣言されていません。非小細胞肺がんに対するmiRNA 200-C-3pの置換と抑制の影響、および免疫チェックポイント機能への影響とその後の抗腫瘍免疫の影響を調査することを目指しました。miRNA 200-c-3p模倣/阻害剤をA549細胞にトランスフェクトしました。549の非小細胞肺癌細胞生存率は、トリパンブルー染色と3-（4、5-ジメチルチアゾール-2-イル）-2,5-ジフェニルテトラゾリウム（MTT）アッセイによって行われました。アポトーシス検出のために、流動性測定分析が行われました。リアルタイムの逆転写 - 定量化ポリメラーゼ連鎖反応（RT-QPCR）およびウエスタンブロット分析を使用して、プログラム細胞死リガンド1（PD-L1）の相対遺伝子発現と相対タンパク質レベルに対する効果を研究しました。最後に、孤立した活性化T細胞との共培養が行われました。一元配置分散分析（ANOVA）に続いて、Tukeyの複数の比較テストを使用して、多重比較を実行しました。細胞生存率の低下、アポトーシスの増加、PD-L1相対遺伝子発現の低下とその相対タンパク質レベル、およびA549 NSCLC細胞株のmiRNA 200-C-3p模倣トランスフェクションの後、腫瘍細胞に対するT細胞細胞毒性の増強が検出されました。ただし、これらの結果は、miRNA 200-c-3p抑制で逆転しました。miRNA 200-c-3pは、PD-L1相対遺伝子発現のダウン調節を通じてである可能性のある非小細胞肺癌細胞で腫瘍抑制効果があり、免疫チェックポイント機能障害を改善するための新しい標的として使用される可能性があります。

MiRNA 200-c-3p has varying functions in different tumor types, whether tumor suppression or promotion. Comprehensive assessment of its function in non-small cell lung cancer (NSCLC) together with its effect on antitumor immune response have not been declared before. We aimed to explore the effect of replacement and suppression of miRNA 200-c-3p on non-small cell lung cancer and its impact on immune checkpoint function and subsequently antitumor immunity. MiRNA 200-c-3p mimic/inhibitor was transfected into the A549 cells. A 549 non-small cell lung cancer cells viability was done by trypan blue staining and 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Flowcytometric analysis was done for apoptosis detection. Real-time reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) and western blot analysis were used to study its effect on relative gene expression and relative protein level of programmed cell death ligand 1 (PD-L1). Finally, co-culture with isolated and activated T cells was performed. Multiple comparisons were performed using one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey's multiple-comparison test. Decreased cell viability, increased apoptosis, reduced PD-L1 relative gene expression and its relative protein level, together with enhanced T cell cytotoxicity towards tumor cells were detected after miRNA 200-c-3p mimic transfection of A549 NSCLC cell line.  However, these results were reversed in miRNA 200-c-3p suppression. MiRNA 200-c-3p had a tumor suppressive effect in non-small cell lung cancer cells which might be through down regulation of PD-L1 relative gene expression, and it may be used as a new target to improve immune checkpoint dysfunction.