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重要な性ホルモンであるテストステロンは、性的成熟、精巣発達、精子形成、および男性の二次性特性の維持を調節します。精巣のleydig細胞は、体内のテストステロン産生の主要な供給源です。中国のガンスの南部にある雌馬豚は、初期の性的成熟、強い病気の抵抗性、粗耐性によって特徴付けられています。この研究では、細胞ふるいろ過と組み合わせたIVコラーゲナーゼ消化を採用して、1ヶ月の卵豚の精巣組織からライディッヒ細胞を分離および精製しました。また、これらの細胞の機能を事前に調査しました。結果は、孤立した精製されたライディッヒ細胞の純度が95％に高いことを示しています。免疫蛍光分析により、分離細胞が3β-ヒドロキシステロイド脱水素抗体を特異的に発現することが実証されました。酵素結合免疫吸着アッセイ結果は、in vitroで培養されたライディッヒ細胞のテストステロン分泌（世代5-9）が1.29-1.67 ng/mlの範囲であることを示しました。さらに、細胞オートファジーシグネチャタンパク質微小管関連タンパク質1軽鎖3の含有量を230-280 pg/mlで測定しました。この研究を通じて、1ヶ月の雌鳥豚からの精巣ライディッヒ細胞の分離、精製、特性評価のためのin vitroシステムを確立し、雌豚の豚の早熟思春期の背後にある分子メカニズムを探索するための参照を提供しました。
重要な性ホルモンであるテストステロンは、性的成熟、精巣発達、精子形成、および男性の二次性特性の維持を調節します。精巣のleydig細胞は、体内のテストステロン産生の主要な供給源です。中国のガンスの南部にある雌馬豚は、初期の性的成熟、強い病気の抵抗性、粗耐性によって特徴付けられています。この研究では、細胞ふるいろ過と組み合わせたIVコラーゲナーゼ消化を採用して、1ヶ月の卵豚の精巣組織からライディッヒ細胞を分離および精製しました。また、これらの細胞の機能を事前に調査しました。結果は、孤立した精製されたライディッヒ細胞の純度が95％に高いことを示しています。免疫蛍光分析により、分離細胞が3β-ヒドロキシステロイド脱水素抗体を特異的に発現することが実証されました。酵素結合免疫吸着アッセイ結果は、in vitroで培養されたライディッヒ細胞のテストステロン分泌（世代5-9）が1.29-1.67 ng/mlの範囲であることを示しました。さらに、細胞オートファジーシグネチャタンパク質微小管関連タンパク質1軽鎖3の含有量を230-280 pg/mlで測定しました。この研究を通じて、1ヶ月の雌鳥豚からの精巣ライディッヒ細胞の分離、精製、特性評価のためのin vitroシステムを確立し、雌豚の豚の早熟思春期の背後にある分子メカニズムを探索するための参照を提供しました。
Testosterone, an important sex hormone, regulates sexual maturation, testicular development, spermatogenesis and the maintenance of secondary sexual characteristics in males. Testicular Leydig cells are the primary source of testosterone production in the body. Hezuo pigs, native to the southern part of Gansu, China, are characterized by early sexual maturity, strong disease resistance and roughage tolerance. This study employed type IV collagenase digestion combined with cell sieve filtration to isolate and purify Leydig cells from the testicular tissue of 1-month-old Hezuo pigs. We also preliminarily investigated the functions of these cells. The results indicated that the purity of the isolated and purified Leydig cells was as high as 95%. Immunofluorescence analysis demonstrated that the isolated cells specifically expressed the 3β-hydroxysteroid dehydrogenase antibody. Enzyme-linked immunosorbent assay results showed that the testosterone secretion of the Leydig cells cultured in vitro (generations 5-9) ranged between 1.29-1.67 ng/mL. Additionally, the content of the cellular autophagy signature protein microtubule-associated protein 1 light chain 3 was measured at 230-280 pg/mL. Through this study, we established an in vitro system for the isolation, purification and characterization of testicular Leydig cells from 1-month-old Hezuo pigs, providing a reference for exploring the molecular mechanism behind precocious puberty in Hezuo pigs.
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