PSLとPCRVを標的とする二重特異的モノクローナル抗体は、気管支拡張症患者における緑膿菌の好中球媒介殺害を促進します

理論的根拠と目的：緑膿菌感染は、気管支拡張症の結果の悪い結果と関連しています。好中球抗菌反応障害は、細菌の持続に寄与します。Gremubamabは、PSLエキソポリサッカライドと3型分泌系成分PCRVを標的とする二価の二重特異的モノクローナル抗体です。この研究では、細気管支菌患者からの好中球による毛虫の殺害を促進し、p.aeruginosa関連の細胞毒性を防ぐために、グレムバマブの有効性を評価しました。 方法：グローバルな気管支拡張症コホート（n = 100）からのP.aeruginosa分離株は、標的有病率を決定するために全ゲノムシーケンスを受けました。選択された分離株に対するグレムバマブの機能活性は、ビトロおよび生体内でテストされました。気管支拡張症（n = 11）およびコントロール（n = 10）の患者が登録され、p.aeruginosaに対する末梢血球オプノファゴシティック殺害（OPK）アッセイにおけるグレムバマブの効果が評価されました。PSLおよびPCRVに対する血清抗体の力価は、OPKおよび抗細胞毒性活性アッセイにおけるグレムバマブ治療の効果と同様に、PSLおよびPCRVに対する血清抗体の力価を決定しました（n = 30; 19：慢性p.aeruginosa感染、11：無知なp.aeruginosa感染）。 測定と結果：PSLとPCRVは、慢性感染した気管支拡張症患者から分離されて保存されていました。73/100分離株には完全なPSL遺伝子座があり、99/100にはPCRV遺伝子が含まれており、20個の異なるフルレングスPCRVタンパク質サブタイプが識別されました。PCRVサブタイプは、GremubamabとMABを媒介した強力な保護活性によって、テストされた分離株に対する強力な保護活動に成功しました。グレムバマブは、気管支拡張患者の好中球を介したOPK（+34.6±8.1％）および食作用（+70.0±48.8％）を増加させ、コントロールからの好中球で観察された効果と同様に（+70.0±48.8％）（+70.0±48.8％）（+70.0±48.8％）。グレムバマブと内因性抗体との間の競争の証拠は見つかりませんでした。患者血清の添加の有無にかかわらず、透明誘発性細胞毒性と強化されたOPKに対する保護を伴いました。 結論：グレムバマブは気管支拡張症患者好中球の食作用と腹膜の殺害と毒性の低下を促進しました。

RATIONALE AND OBJECTIVES: Pseudomonas aeruginosa infection is associated with worse outcomes in bronchiectasis. Impaired neutrophil antimicrobial responses contribute to bacterial persistence. Gremubamab is a bivalent, bispecific monoclonal antibody targeting Psl exopolysaccharide and the type 3 secretion system component PcrV. This study evaluated the efficacy of gremubamab to enhance killing of P.aeruginosa by neutrophils from bronchiectasis patients and to prevent P.aeruginosa-associated cytotoxicity. METHODS: P.aeruginosa isolates from a global bronchiectasis cohort (n=100) underwent whole-genome sequencing to determine target prevalence. Functional activity of gremubamab against selected isolates was tested in-vitro and in-vivo. Patients with bronchiectasis (n=11) and controls (n=10) were enrolled and the effect of gremubamab in peripheral-blood neutrophil opsonophagocytic killing (OPK) assays against P.aeruginosa was evaluated. Serum antibody titers to Psl and PcrV were determined (n=30; 19: chronic P.aeruginosa infection, 11: no-known P.aeruginosa infection), as was the effect of gremubamab treatment in OPK and anti-cytotoxic activity assays. MEASUREMENTS AND RESULTS: Psl and PcrV were conserved in isolates from chronically-infected bronchiectasis patients. 73/100 isolates had a full psl locus and 99/100 contained the pcrV gene, with 20 distinct full-length PcrV protein subtypes identified. PcrV subtypes were successfully bound by gremubamab and the mAb mediated potent protective activity against tested isolates. Gremubamab increased bronchiectasis patient neutrophil-mediated OPK (+34.6±8.1%) and phagocytosis (+70.0±48.8%), similar to effects observed in neutrophils from controls (OPK:+30.1±7.6%). No evidence of competition between gremubamab and endogenous antibodies was found, with protection against P.aeruginosa-induced cytotoxicity and enhanced OPK demonstrated with and without addition of patient serum. CONCLUSION: Gremubamab enhanced bronchiectasis patient neutrophil phagocytosis and killing of P.aeruginosa and reduced virulence.