非複製紫外線照射DNAの修復：大腸菌UVRおよびPHR機能に​​よる協同組合暗い修復

以前は、非複製紫外線照射ファージラムダDNAの組換えを研究するために使用されていたシステムは、UV修復の研究に適応しました。照射されたファージは、損傷を受けていないホモ免疫性リソゲンに感染しました。ピリミジン二量体含有量（ミクロコッカスluteus UVエンドヌクレアーゼおよびアルカリスクロース沈降による治療により）および生物活性エンドポイント（UVRB Reca Recb球状のトランスフェクションにおける感染性）が続きました。DNA抽出手順中に部屋の光が除外されていない限り、光反応性（PHR機能）は有意でした。UVR Delta Fr Bacteriaでは、両方のアッセイによる修復は非常に低かったが、ゼロではなかった。光が完全に除外されたときでさえ、PhR機能はUVRを介した切除修復に役割を果たすように見えました。感染性のダイマー除去と回復の両方は、UVR+ Delta Phr BacteriaのようにUVR+ PhR+細菌で2〜5倍効率的でした。同様に、完全に暗い条件下であっても、Delta Phr BacteriaよりもPhR+の効率が高い播種されたUV照射ファージ。UVR PHR+抑制された感染症では、非複製DNAからの二量体の除去は、UVR+感染症と同じくらい感染性を増加させず、UVRABCシステムによる非微細光生成物の修復の要件を示唆しています。

The system previously used to study recombination of nonreplicating UV-irradiated phage lambda DNA was adapted to study UV repair. Irradiated phages infected undamaged homoimmune lysogens. Pyrimidine dimer content (by treatment with Micrococcus luteus UV endonuclease and alkaline sucrose sedimentation) and a biological activity endpoint (infectivity in transfection of uvrB recA recB spheroplasts) were followed. Unless room light was excluded during DNA extraction procedures, photoreactivation (Phr function) was significant. In uvr delta phr bacteria, repair, by both assays, was very low but not zero. Even when light was totally excluded, Phr function appeared to play a role in Uvr-mediated excision repair: both dimer removal and restoration of infectivity were two to five times as efficient in uvr+ phr+ bacteria as in uvr+ delta phr bacteria. Similarly, UV-irradiated phages plated with higher efficiencies on phr+ than delta phr bacteria even under totally dark conditions. In uvr phr+ repressed infections, removal of dimers from nonreplicating DNA did not increase infectivity as much as in uvr+ infections, suggesting a requirement for repair of nondimer photoproducts by the uvrABC system.