合成されたナノボディライブラリに基づいてクマフォスのナノボディを生成するための新しい戦略

免疫原の合成、複雑さ、および不可能な免疫効率の合成の困難によって誘発される化学汚染物質のナノボディ（NB）の準備においてボトルネックを突破するために、最終サイズまでの設計された合成NBライブラリに基づいてNBを生成する新しい戦略である109 CFU/MLが採用され、抗クマフォスNB A4の選択に成功しました。さらに、アフィニティ患者の変異体Nb 3Gが二次ライブラリから取得されました。最後に、Coumaphosの検出限界が1.90 ng/mlに、親NB A4より6.4倍改善され、検出の範囲は3.06から15.77 ng/mlのIC-ELISAが確立されました。一方、植物サンプルの回収率は89.9％から98.5％でした。最後に、R2を最大0.99の標準UPLC-MS/MSメソッドによって精度を証明しました。全体として、この作業で構築された完全な合成NBライブラリは、化学汚染物質用の特定のNBを生成する代替の可能性を提供しました。

To break through the bottleneck in preparation of nanobody (Nb) for chemical contaminants induced by the difficulties in the synthesis of immunogen, complexity and unexpectable efficiency of immunization, a novel strategy to generate Nbs based on the designed synthetic Nb libraries with final size up to 109 cfu/mL was adopted and succeeded in selection of anti-coumaphos Nb A4. Furthermore, an affinity-matured mutant Nb 3G was obtained from the secondary library. Finally, an ic-ELISA was established with the limit of detection for coumaphos low to 1.90 ng/mL, 6.4-fold improved than the parent Nb A4, and the detection range from 3.06 to 15.77 ng/mL. Meanwhile, the recovery rate of vegetable samples was from 89.9% to 98.5%. Finally, the accuracy was testified by the standard UPLC-MS/MS method with R2 up to 0.99. Overall, fully synthetic Nb libraries constructed in this work provided an alternative possibility to generate the specific Nbs for chemical contaminants.