RBM15を介したN6-メチルアデノシン（M6A）EZH2の修飾は、子宮頸がんの上皮間葉系移行を促進する

RBM15は、多型がんの癌遺伝子として機能します。ただし、子宮頸がんにおけるRBM15の役割に関する報告は限られています。この研究の目的は、子宮頸がんのRBM15の可能性を調査することでした。RT-QPCRは、mRNAレベルを決定するために実施されました。西部は、タンパク質の発現を検出するために実施されました。CCK-8、コロニー形成およびEDUアッセイを実施して、細胞増殖を決定しました。細胞の移動と浸潤を決定するために、スクラッチおよびトランスウェルアッセイが実施されました。N6-メチルアデノシン（M6A）レベルを決定するために、Meripアッセイを実施しました。ルシフェラーゼアッセイは、EZH2のM6A部位とEZH2とFN1のプロモーターの間の結合部位を検証するために実施されました。EZH2とFN1の間の相互作用を検証するために、チップアッセイを実施しました。結果は、RBM15が子宮頸がん患者および細胞で上方制御されていることを示しました。さらに、高レベルのRBM15は臨床転帰不良を予測しました。RBM15ノックダウンは、子宮頸がん細胞の増殖および上皮間葉系遷移（EMT）を阻害しました。RBM15は、EZH2のM6A修飾とそのタンパク質翻訳を促進しました。さらに、フィブロネクチン1（FN1）およびEZH2-FN1軸のプロモーターに結合したEZH2は、RBM15の下流のカスケードです。EZH2過剰発現は、RBM15ノックダウンの効果に拮抗し、子宮頸がん細胞の攻撃性を促進しました。要約すると、RBM15/EZH2/FN1シグナル伝達カスケードは、子宮頸がんの増殖とEMTを誘導します。したがって、RBM15/EZH2/FN1シグナル伝達は、子宮頸がんの有望な戦略である可能性があります。

RBM15 functions as an oncogene in multi-type cancers. However, the reports on the roles of RBM15 in cervical cancer are limited. The purpose of this study was to investigate the potentials of RBM15 in cervical cancer. RT-qPCR was conducted to determine mRNA levels. Western was carried out to detect protein expression. CCK-8, colony formation and EdU assays were conducted to determine cell proliferation. Scratch and transwell assays were conducted to determine cell migration and invasion. MeRIP assay was conducted to determine N6-methyl adenosine (m6A) levels. Luciferase assay was conducted to verify the m6A sites of EZH2 and binding sites between EZH2 and promoter of FN1. ChIP assay was conducted to verify the interaction between EZH2 and FN1. The results showed that RBM15 was upregulated in cervical cancer patients and cells. Moreover, high levels of RBM15 predicted poor clinical outcomes. RBM15 knockdown inhibited the proliferation and epithelial-mesenchymal transition (EMT) of cervical cancer cells. RBM15 promoted the m6A modification of EZH2 as well as its protein translation. Additionally, EZH2 bound to the promoter of fibronectin 1 (FN1) and EZH2-FN1 axis is the cascade downstream of RBM15. Overexpressed EZH2 antagonized the effects of RBM15 knockdown and promoted the aggressiveness of cervical cancer cells. In summary, RBM15/EZH2/FN1 signaling cascade induces the proliferation and EMT of cervical cancer. Therefore, RBM15/EZH2/FN1 signaling may be a promising strategy for cervical cancer.