分割 - ルシフェラーゼアッセイの開発は、亜種によるタンパク質産生の最適なタンパク質分泌条件を確立する

Subtilisは、その優れたタンパク質分泌能力のために、さまざまなタンパク質の生産のためにバイオ産業で頻繁に使用されるグラム陽性の細菌です。B. subtilisによるタンパク質分泌の最適な条件を決定するには、タンパク質分泌を測定するための迅速かつ敏感な方法が重要です。高速で普遍的なアッセイは、高スループットの方法で多様なタンパク質を検出するのに最も役立ちます。この研究では、B。subtilisによるタンパク質分泌を測定するためのスプリット - ルシフェラーゼベースの方法を紹介します。ナノビット系は、キシラナーゼA、アミラーゼM、タンパク質グルタミナーゼA、およびGFPナノボディの4つの異なるタンパク質の分泌を監視するために使用されました。私たちの調査結果は、迅速で敏感でユーザーフレンドリーな方法として、スプリットルシフェラーゼシステムを強調しています。

Bacillus subtilis is a Gram-positive bacterium that is frequently used in the bioindustry for the production of various proteins, because of its superior protein secretion capacities. To determine optimal conditions for protein secretion by B. subtilis, a quick and sensitive method for measuring protein secretion is crucial. A fast and universal assay is most useful for detecting diverse proteins in a high-throughput manner. In this study, we introduce a split-luciferase-based method for measuring protein secretion by B. subtilis. The NanoBiT system was used to monitor secretion of four different proteins: xylanase A, amylase M, protein glutaminase A, and GFP nanobody. Our findings underscore the split-luciferase system as a quick, sensitive, and user-friendly method.