F8遺伝子増強と組み合わせたNEAT1 lncRNAのAAV媒介抑制は、血液中の関節疾患の病理学的メディエーターを緩和します

血友病性関節症（HA）は、血液性患者の一般的な併存疾患であり、関節痛、変形、生活の質の低下につながります。最近、マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP）3およびMMP13活性の主要な調節因子としての長い非コーディングRNA、NEAT1が、標的関節での誘導が関節軟骨に悪化する効果があることを実証しました。本研究では、カプシド修飾AAV8（K31Q）ベクター運搬用ベクター運搬用ベクターの全身投与との関節内注入のみまたは組み合わせて、短いヘアピン（SH）RNAを運ぶアデノ関連ウイルス（AAV）5ベクターをNEAT1に運ぶ5ベクターを投与しました。F8遺伝子（F8-BDD-V3）は、HAへの影響を研究しています。低用量でのAAV8K31Q-F8ベクター投与により、治療マウスのFVIII活性（16％-28％）が増加しました。さらに、処理されたマウスの関節組織におけるNEAT1（〜40倍の折りたたみ型負傷関節、p = 0.005）の有意なノックダウンと、軟骨変性酵素、MMP13、および炎症性媒介性因子CPLA2のダウンレギュレーションが併用療法を受けていることを観察しました。。これらのデータは、F8遺伝子の増強と組み合わせてAAVを介したNeAT1ノックダウンが、血友病性関節疾患のメディエーターに潜在的に影響を与える可能性があることを示しています。

Haemophilic arthropathy (HA), a common comorbidity in haemophilic patients leads to joint pain, deformity and reduced quality of life. We have recently demonstrated that a long non-coding RNA, Neat1 as a primary regulator of matrix metalloproteinase (MMP) 3 and MMP13 activity, and its induction in the target joint has a deteriorating effect on articular cartilage. In the present study, we administered an Adeno-associated virus (AAV) 5 vector carrying an short hairpin (sh)RNA to Neat1 via intra-articular injection alone or in conjunction with systemic administration of a capsid-modified AAV8 (K31Q) vector carrying F8 gene (F8-BDD-V3) to study its impact on HA. AAV8K31Q-F8 vector administration at low dose, led to an increase in FVIII activity (16%-28%) in treated mice. We further observed a significant knockdown of Neat1 (~40 fold vs. untreated injured joint, p = 0.005) in joint tissue of treated mice and a downregulation of chondrodegenerative enzymes, MMP3, MMP13 and the inflammatory mediator- cPLA2, in mice receiving combination therapy. These data demonstrate that AAV mediated Neat1 knockdown in combination with F8 gene augmentation can potentially impact mediators of haemophilic joint disease.