拡張されたコザック要素の最適化は、CHO細胞の組換えタンパク質発現を強化します

真核生物では、mRNA転写産物への小さなリボソームサブユニットの局在化には、開始部位でのコザック要素の翻訳が必要です。コザック要素のシーケンスは、タンパク質合成の翻訳効率に影響します。しかし、コザック配列の上流のヌクレオチドが中国のハムスター卵巣（CHO）細胞における組換えタンパク質の発現に影響するかどうかは不明のままです。CHO細胞の組換えタンパク質発現を促進する最適な配列を見つけるために、100個のCHO遺伝子のATG周辺の-10〜 +4シーケンスを比較し、異なる翻訳強度を持つ拡張されたコザック要素を構築しました。古典的なコザック要素をコントロールとして使用して、分泌されたアルカリホスファターゼ（SEAP）およびヒト血清アルブミン（HSA）遺伝子に対する最適化された拡張コザック要素の効果を研究しました。結果は、最適化された拡張コザック配列がCHO細胞の組換えタンパク質の安定した発現レベルを高めることができることを示しました。さらに、組換えタンパク質の発現レベルの増加は、転写レベルの高いとは関係がないことがわかった。要約すると、拡張されたコザック要素を最適化することで、CHO細胞の組換えタンパク質の発現を強化することができ、CHO細胞の効率的な発現システムの構築に寄与します。

In eukaryotes, the localization of small ribosomal subunits to mRNA transcripts requires the translation of Kozak elements at the starting site. The sequence of Kozak elements affects the translation efficiency of protein synthesis. However, whether the upstream nucleotide of Kozak sequence affects the expression of recombinant proteins in Chinese hamster ovary (CHO) cells remains unclear. In order to find the optimal sequence to enhance recombinant proteins expression in CHO cells, -10 to +4 sequences around ATG in 100 CHO genes were compared, and the extended Kozak elements with different translation intensities were constructed. Using the classic Kozak element as control, the effects of optimized extended Kozak elements on the secreted alkaline phosphatase (SEAP) and human serum albumin (HSA) gene were studied. The results showed that the optimized extended Kozak sequence can enhance the stable expression level of recombinant proteins in CHO cells. Furthermore, it was found that the increased expression level of the recombinant protein was not related with higher transcription level. In summary, optimizing extended Kozak elements can enhance the expression of recombinant proteins in CHO cells, which contributes to the construction of an efficient expression system for CHO cells.