二重盲検免疫電子顕微鏡を使用したキュウリの子葉植物の発芽におけるグリオキシソーム - ペロキシソーム遷移の調査

キュウリの苗の子葉の微生物は、初期のジールミネティブ発達中に2つの連続した代謝機能を実行します。最初の4または5日の間に、グリオキシレートサイクル酵素は、グリオキシソームと呼ばれる微生物に蓄積します。3日目頃から、微生物に微量体に急速に蓄積する光光化グリコール酸代謝に関与する酵素の光誘導活性が微量で蓄積されます。子葉微生物微生物がグリオキシソームからペルオキシソーム代謝への機能的移行を受けると、両方の酵素のセットが同時に存在し、異なる機能を持つ微生物の2つの異なる集団内または二重関数を持つ単一集団の微生物のいずれか内にあります。タンパク質A-Gold免疫電子顕微鏡を使用して、2つのグリオキシレートサイクル酵素、アイソクエン酸リアーゼ（ICL）およびマロ酸シンターゼ、2つのグリコーゼ酸経路酵素、セリン、セリン：グリオキシレートアミノトランスフェラーゼ（SGAT）およびヒドロキシピルビル酸ピルビン酸塩stageの節、マイクロビン酸型浸透加工、マイク4）子葉。二重適応免疫電子顕微鏡検査を使用して、個々の微生物内のICLとSGATの共存を直接実証し、2人口の仮説を信用していませんでした。Protein A-Gold標識密度の定量により、標識が微生物に特異的であることが確認されました。脂質体、葉緑体、または両方のオルガネラに隣接する微生物におけるICLまたはSGATの免疫標識の定量化により、これらの3つのカテゴリーで非常に類似した標識密度が明らかになり、グリオキシソマールおよびペルオキシサマル酵素の濃度は、おそらく移行段階の微生物に基づいて予測することはできないことを示唆しています。微生物と他のオルガネラとの見かけの関連。

Microbodies in the cotyledons of cucumber seedlings perform two successive metabolic functions during early postgerminative development. During the first 4 or 5 d, glyoxylate cycle enzymes accumulate in microbodies called glyoxysomes. Beginning at about day 3, light-induced activities of enzymes involved in photorespiratory glycolate metabolism accumulate rapidly in microbodies. As the cotyledonary microbodies undergo a functional transition from glyoxysomal to peroxisomal metabolism, both sets of enzymes are present at the same time, either within two distinct populations of microbodies with different functions or within a single population of microbodies with a dual function. We have used protein A-gold immunoelectron microscopy to detect two glyoxylate cycle enzymes, isocitrate lyase (ICL) and malate synthase, and two glycolate pathway enzymes, serine:glyoxylate aminotransferase (SGAT) and hydroxypyruvate reductase, in microbodies of transition-stage (day 4) cotyledons. Double-label immunoelectron microscopy was used to demonstrate directly the co-existence of ICL and SGAT within individual microbodies, thereby discrediting the two-population hypothesis. Quantitation of protein A-gold labeling density confirmed that labeling was specific for microbodies. Quantitation of immunolabeling for ICL or SGAT in microbodies adjacent to lipid bodies, to chloroplasts, or to both organelles revealed very similar labeling densities in these three categories, suggesting that concentrations of glyoxysomal and peroxisomal enzymes in transition-stage microbodies probably cannot be predicted based on the apparent associations of microbodies with other organelles.