メタノール処理ホモジネートを加熱することにより、ヒト肝臓からのフェリチンの精製の手順

ヒトの肝臓組織からのフェリチンを浄化するためのシンプルで迅速な技術について説明します。メタノールは、肝臓ホモジネートの40％（v/v）の最終濃度で、タンパク質の大部分を沈殿させますが、フェリチンには影響しません。75度Cでのこのホモジネートのその後の加熱は、免疫電気泳動とポリアクリルアミドゲル電気泳動によって判断されるように、精製フェリチン調製をもたらします。得られた精製フェリチンには、元の内因性フェリチンと同じ量の鉄が含まれていました。ロケット免疫電気泳動およびローリー手順で測定した場合、精製フェリチン調製のタンパク質の量に有意差はありませんでした。内因性肝臓フェリチンと肝臓ホモジネートに添加した肝臓ホモジネートに添加したヒト肝臓フェリチンの両方を、同様の収量で同様の収率で回収しました（それぞれ77 +/- 7％および70 +/- 2％）ホモ酸ホモ酸塩の加熱の標準的な処理と比較した場合75度Cでは、この迅速な手順での全体的なフェリチン収量は40％でした。

A simple, rapid technique for purification of ferritin from human liver tissue is described. Methanol, at a final concentration of 40% (v/v) in liver homogenate, precipitates the majority of proteins but does not affect ferritin. Subsequent heating of this homogenate at 75 degrees C for 10 min results in a purified ferritin preparation as judged by immunoelectrophoresis and polyacrylamide gel electrophoresis. The resultant purified ferritin contained the same amount of iron as the original endogenous ferritin. There were no significant differences (paired t tests) in the amount of protein in the purified ferritin preparation when measured by rocket immunoelectrophoresis and by the Lowry procedure, suggesting that the antigenecity of ferritin was unaffected by the methanol and heat treatment. Both endogenous liver ferritin and radiolabeled human liver ferritin added to liver homogenates were recovered after methanol and heat treatment with similar yields (77 +/- 7% and 70 +/- 2%, respectively) when compared with the standard treatment of heating a homogenate at 75 degrees C. The overall ferritin yield with this rapid procedure was 40%.