環状アデノシン単リン酸および中国のハムスター卵巣細胞形態の変化：ヴィブリオコレラ科と大腸菌のエンテロ毒素に対する迅速で敏感なin vitroアッセイ

下痢性疾患における腸毒素性大腸菌の臨床的重要性に関する私たちの理解に対する主な制限は、特定の大腸菌によって生成されたエンテロトキシンの単純な迅速なアッセイの欠如です。大腸菌（LT）の熱毒性エンテロトキシンおよび腸およびその他の組織におけるコレラ毒素（CT）によるアデニル酸シクラーゼの活性化に基づいて、ジブリル環状アデノシンに対する既知の形態学的反応を持つ培養中国のハムスター卵巣（CHO）細胞5'-モノリン酸（AMP）がこれらのエンテロトキシンにさらされました。LT産生大腸菌およびCTの粗培養ろ液は、CHO細胞における環状アンプの蓄積と細胞伸長を刺激しました。ホスホジエステラーゼ阻害剤による時間経過、濃度依​​存、および増強の類似性は、形態学的変化の環状AMP媒介を示唆しました。このシステムでは、不活性化CTおよびLTを熱します。コレゲノイドはCTを阻害しました。CTに対する抗血清は、両方のエンテロトキシン効果を阻害しました。LTを産生することが知られている16株の16株の培養ろ液とは対照的に、LTを産生しない13の大腸菌の培養ろ液はCHO細胞の形態を変化させませんでした。形態学的変化は、これらのエンテロトキシンの単純な特異的アッセイであり、3 x 10（-17）molのCTまたはLT産生の粗培養ろ液の1：250希釈を検出します334。

The major limitation to our understanding of the clinical importance of enterotoxigenic Escherichia coli in diarrheal illness has been the lack of a simple rapid assay for the enterotoxin produced by certain E. coli. On the basis of the activation of adenylate cyclase by heat-labile enterotoxin of E. coli (LT) and by cholera toxin (CT) in intestinal and other tissues, cultured Chinese hamster ovary (CHO) cells with known morphological responses to dibutyryl cyclic adenosine 5'-monophosphate (AMP) were exposed to these enterotoxins. Crude culture filtrates of LT-producing E. coli and CT stimulated cyclic AMP accumulation and cell elongation in CHO cells. The similarity of time course, concentration dependence, and potentiation by phosphodiesterase inhibitors suggested cyclic AMP mediation of the morphological change. Heat inactivated CT and LT in this system. Choleragenoid inhibited CT; antiserum against CT inhibited both enterotoxin effects. In contrast to culture filtrates of 16 strains of E. coli known to produce LT, culture filtrates from 13 E. coli that do not produce LT did not alter CHO cell morphology. The morphological change is a simple, specific assay for these enterotoxins and detect 3 x 10(-17) mol of CT or a 1:250 dilution of crude culture filtrate of LT-producing E. coli 334.