ヒトIgA免疫グロブリンの連鎖球菌IgAプロテアーゼの微分感受性

ヒト唾液および結腸液に見られるタンパク質分解酵素であるIgAプロテアーゼは、ヒト血清IgA免疫グロブリンを加水分解してFAB（アルファ）およびFC（アルファ）フラグメントを生成します。酵素は、正常なヒト微生物叢の生物によって生成され、一般的なヒト経口生物の培養濾液から精製できます。IgAプロテアーゼは、ヒト免疫グロブリンの他のクラスを含む、調査された他のすべてのタンパク質基質に対して非アクティブです。分泌IgA免疫系の機能に影響を与えるこの酵素の役割は不明です。この異常な基質特異性をさらに特徴付け、説明するために、両方のサブクラスの31のヒトIgA骨髄腫タンパク質の感受性を調査しました。16 Iga1および15 Iga2骨髄腫傍タンパク質を酵素で処理し、タンパク質溶解の程度は、セルロース作用電気泳動、免疫電気泳動、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、およびカラムクロマトグラフィーによって決定されました。すべてのIga1タンパク質は、酵素的にFab（アルファ）およびFc（アルファ）フラグメントに切断されましたが、すべてのIga2タンパク質は耐性があり、長期にわたる酵素治療後に断片を生成しませんでした。単一のIgA1パラタンパク質の精製FC（アルファ）フラグメントのN末端アミノ酸配列分析は、次のとおりでした：thr-pro-ser-pro - ？-thr-pro-pro-pro-pro-ser-pro-ser。IGA1重鎖で報告されているこの配列との比較は、酵素感受性ペプチド結合がIGA1ヒンジ領域のプロスルであることを示しています。IgA2サブクラスのIgAプロテアーゼに対する耐性の最も可能性の高い説明は、感受性のプロ溶液の重要なスレオニンから始まる重鎖の欠失です。

IgA protease, a proteolytic enzyme found in human saliva and colonic fluid, hydrolyzes human serum IgA immunoglobulins to yield Fab(alpha) and Fc(alpha) fragments. The enzyme is produced by organisms in the normal human microflora and can be purified from culture filtrates of the common human oral organism Streptococcus sanguis (American Type Culture Collection no. 10556). IgA protease is inactive against all other protein substrates examined including the other classes of human immunoglobulins. The role of this enzyme in affecting the function of the secretory IgA immune system is unknown. To further characterize and explain this unusual substrate specificity, the susceptibility of 31 human IgA myeloma proteins of both subclasses was investigated. 16 IgA1 and 15 IgA2 myeloma paraproteins were treated with enzyme and the extent of proteolysis was determined by cellulose actate electrophoresis, immunoelectrophoresis, polyacrylamide gel electrophoresis, and column chromatography. All IgA1 proteins were enzymatically cleaved to Fab(alpha) and Fc(alpha) fragments, but all IgA2 proteins were resistant, yielding no fragments after prolonged enzymatic treatment. N-terminal amino acid sequence analysis of the purified Fc(alpha) fragment of a single IgA1 paraprotein was as follows: Thr-Pro-Ser-Pro-?-Thr-Pro-Pro-Thr-Pro-Ser-Pro-Ser. Comparison of this sequence to that reported for the IgA1 heavy chain shows that the enzyme-susceptible peptide bond is a Pro-Thr in the IgA1 hinge region. The most likely explanation of the resistance of the IgA2 subclass to IgA protease is a deletion in the heavy chain which commences with the critical threonine of the susceptible Pro-Thr bond.