脳および末梢組織におけるメチオニン - エンケファリンとロイシンエンケファリンの分布

1脳および他の組織からのオピオイドペプチドの迅速な抽出の方法が説明されています。この方法は、組織の酸抽出に基づいて、それに続く抽出物がアンバーライトXAD-2樹脂に吸着します。メタノールによる溶出は、エンケファリンとアルファエンドルフィンをベータエンドルフィンから分離します。2脳から分離されたオピオイドペプチド活性の90％を超えて、私たちの方法によっていくつかの種のいくつかの種の腸はメチオニンとレシン - エンケファリンによるものでした。対照的に、下垂体から回収された主要なオピオイドペプチド活性は、はるかに大きなモルのペプチドによるものでした。wt。enkephalins.3既知のエンドルフィンやエンケファリンとは異なり、特性を持つオピオイドペプチドが脳抽出物に存在していました。エプシロンとエンドルフィンと呼ばれるこのペプチドには、明らかな分子があります。wt。700〜1200;抽出物の総オピオイド活性の5〜10％を構成しました。4メチオニンとロイシン - エンケファリンの微分アッセイは、メチオニンエンケファリン活性を臭化シアンで破壊するか、薄層クロマトグラフィーでペプチドを分離することにより行われました。メチオニン - エンケファリンとロイシン - エンケファリンの比は、異なる脳領域で大きく異なりました。ロイシンエンケファリンの最高の割合は、大脳皮質と海馬で発見されました。6ホルムアルデヒド灌流とin vivoの脳の固定は、エンケファリンの脳含有量に有意な効果がありませんでした。これらのペプチド。7エンケファリンは、脳と末梢組織の両方に神経伝達物質の役割を持っている可能性があり、メチオニンとロイシン - エンケファリンが別々の神経機能に耐えることができることが示唆されています。

1 A method is described for the rapid extraction of opioid peptides from the brain and other tissues. The method is based on acid extraction of tissues followed by adsorption of the extract onto Amberlite XAD-2 resin. Elution with methanol separates the enkephalins and alpha-endorphin from beta-endorphin.2 Over 90% of the opioid peptide activity isolated from brain and gut of several species by our method was due to methionine- and leucine-enkephalin. In contrast, the major opioid peptide activity recovered from the pituitary was due to peptides of much greater mol. wt. than the enkephalins.3 An opioid peptide with properties unlike those of the known endorphins or enkephalins was present in brain extracts. This peptide, termed epsilon-endorphin, has an apparent mol. wt. of 700 to 1200; it constituted between 5 to 10% of the total opioid activity in our extracts.4 A differential assay of methionine- and leucine-enkephalin was made either by destroying methionine-enkephalin activity with cyanogen bromide or by separating the peptides by thin layer chromatography.5 The ratio of methionine-enkephalin to leucine-enkephalin varied greatly in different brain regions. The highest proportions of leucine-enkephalin were found in the cerebral cortex and hippocampus.6 Formaldehyde perfusion and fixation of the brain in vivo had no significant effect on the brain content of enkephalin, indicating that proteolytic breakdown is not a major problem in the extraction of these peptides.7 It is suggested that the enkephalins may have a neurotransmitter role in both brain and peripheral tissues and that methionine- and leucine-enkephalin may subserve separate neuronal functions.