培養における細胞によるトロンボスポンジン分泌の調節

450,000の分子量糖タンパク質であるトロンボスポンディン（TS）は、トロンビン活性化血小板のアルファ顆粒から放出され、培養中のいくつかの細胞タイプによって分泌されて細胞外マトリックスに組み込まれます。細胞密度と形質転換が細胞培養におけるTSの産生に対する影響を調べました。細胞あたり、細胞ごとの培地、平滑筋細胞、および線維芽細胞のTSのレベルは、細胞密度の低下で大きかった。線維芽細胞では、他の2つの細胞外マトリックスタンパク質のレベルであるフィブロネクチンとコラーゲンは、細胞密度の影響を受けませんでした。私たちの証拠は、低密度細胞のために決定される培地中のより高いレベルのTSが、細胞外マトリックスへの分解または取り込みの減少ではなく、タンパク質の分泌の増加によって達成されたことを示しています。正常および形質転換されたWI-38線維芽細胞によるTS産生は同じでしたが、形質転換細胞の培地のフィブロネクチンレベルは大幅に減少しました。これらの発見は、培養中の細胞によるTSの産生がフィブロネクチンまたはコラーゲンのそれとは異なる方法で調節されていることを示唆しています。

Thrombospondin (TS), a 450,000 molecular weight glycoprotein, is released from alpha-granules of thrombin-activated platelets and is secreted and incorporated into the extracellular matrix by several cell types in culture. We have examined the effects of cell density and transformation on the production of TS in cell culture. The levels of TS, per cell, in the culture medium of endothelial cells, smooth muscle cells, and fibroblasts were greater at lower cell densities; in fibroblasts the levels of two other extracellular matrix proteins, fibronectin and collagen, were unaffected by cell density. Our evidence indicates that the higher levels of TS in the culture medium, determined for lower-density cells, were achieved by an increased secretion of the protein rather than by a reduction in degradation or incorporation into the extracellular matrix. TS production by normal and transformed WI-38 fibroblasts was the same, although the fibronectin level in the culture medium of the transformed cells was substantially decreased. These findings suggest that the production of TS by cells in culture is regulated in a different fashion from that of fibronectin or collagen.