硫化物および他のリガンドとシトクロムcオキシダーゼとの相互作用電子パラマグネティック共代体研究

安静時の酸化シトクロムCオキシダーゼに対する硫化物の効果は、両方のE.P.R.および光吸収分光法。過剰な硫化物は、シトクロムA、CUA、CUBのいくらかの減少を引き起こし、約1分後にシトクロムA3-SH複合体の形成を引き起こします。過剰な硫化物の存在下で数時間後、E.P.R。低スピンの鉄皮毒子A3-shによるシグナルは持続し、部分的に還元された種を与えます。この部分的に減少したフェリシアニドによる硫化物結合酵素の再酸化により、E.P.R。硫化物が減少し、カブに結合し、フェリシトクロムA3に結合したと結論付けています。皮膚カブに結合する硫化物は、その中間点の可能性を高め、再酸化を困難にする可能性があります。還元剤（アスコルビン酸 + nnn'n'-テトラメチル-P-フェニレンジアミン）を添加し、酸化酵素に硫化物を一緒に添加し、シトクロムAとCUAがほぼ完全に還元され、シトクロムA3がE.P.R.検出可能であるという種を産生します。低スピン硫化物結合複合体の1つのヘムの80％。この部分的に還元された誘導体のg = 12信号は、安静時の酵素のそれと比較して、ほとんど変化していません。これは、g = 12信号が酵素の20％未満から生じる可能性があり、ライゲーションと還元の両方に比較的反応しない可能性があることを示唆しています。オキシダーゼのg = 12形式のこのような反応性パターンは、それぞれシトクロムA3とCubに結合すると考えられているリガンドf-およびnoで実証されています。

The effect of sulphide on resting oxidized cytochrome c oxidase was studied by both e.p.r. and optical-absorption spectroscopy. Excess sulphide causes some reduction of cytochrome a, CuA and CuB, and the formation of the cytochrome a3-SH complex after about 1 min. After several hours in the presence of excess sulphide only the e.p.r. signals due to low-spin ferricytochrome a3-SH persist, giving a partially reduced species. Re-oxidation of this partially reduced sulphide-bound enzyme by ferricyanide makes all of the metal centres except CuB detectable by e.p.r. We conclude that sulphide has reduced and binds to CuB as well as to ferricytochrome a3. Sulphide binding to cuprous CuB may raise its mid-point potential and make re-oxidation difficult. Addition of reductant (ascorbate + NNN'N'-tetramethyl-p-phenylenediamine) and sulphide together to the oxidized resting enzyme produces a species in which cytochrome a and CuA are nearly completely reduced and cytochrome a3 is e.p.r.-detectable as approx. 80% of one haem in the low-spin sulphide-bound complex. The g = 12 signal of this partially reduced derivative is almost unchanged in magnitude relative to that of the resting enzyme; this suggests that the g = 12 signal may arise from less than 20% of the enzyme and that it may be relatively unreactive to both ligation and reduction. Such a reactivity pattern of the g = 12 form of the oxidase is also demonstrated with the ligands F- and NO, which are thought to bind to cytochrome a3 and CuB respectively.