関節リウマチ患者の血清からのポリクローナルB細胞活性化因子に対するプロテアーゼ阻害剤の効果

ポリクローナルB細胞刺激により、自己抗体と免疫複合体が形成されることが報告されています。我々は、アルファ2-マクログロブリン（アルファ2M）に関連するポリクローナルB細胞活性化因子（PBA）が関節リウマチおよび関連疾患の患者の血清に存在することを以前に報告しました。ここでは、患者アルファ2M（PT-alpha 2M）がPBA活性の原因となるトリプシン様プロテアーゼを持つ可能性を研究しました。この活動は、研究所で開発されたIGターナーアッセイによって決定されました。小分子量プロテアーゼ阻害剤、アプロチニン（Trasylol、Bayer）およびフェニルメチルスルホニルフルオリド（PMSF）、および大分子量大豆トリプシン阻害剤（SBTI）を使用しました。これらの阻害剤は、LPSのDextran硫酸塩のPBA活性に影響を与えませんでした。しかし、予想どおり、トリプシンは上記のすべての阻害剤によってブロックされたPBA活性がありました。SBTIではなく、PMSFまたはアプリチニンによって阻害されたトリプシン - 正規アルファ2M複合体（TR-Nアルファ2M）およびPBA活性。PT-alpha 2Mに関連するPBAは、PMSFまたはアプリチニンによっても阻害されましたが、SBTIによっては阻害されませんでした。さらに、TR-Nアルファ2M複合体とpt-alpha 2Mは、正常なドナーからのものではなく、p-トルエンスルホニル-L-アルギニネメチルエステルのエステラーゼ活性を持っていました。これらのデータは、PT-Alpha 2MとTR-N Alpha 2M複合体の類似性を示唆しています。したがって、我々は、Esterololitic ActivityはPBA活性に十分であり、PT-Alpha 2Mはエステロ分解活性を持ち、このPBA活性は小分子量プロテアーゼ阻害剤によってブロックされる可能性があると結論付けました。

It has been reported that polyclonal B cell stimulation results in formation of autoantibodies and immune complexes. We have previously reported that a polyclonal B cell activator (PBA) associated with alpha 2-macroglobulin (alpha 2M) is present in the serum of patients with rheumatoid arthritis and related diseases. Here we studied the possibility that patient alpha 2M (Pt-alpha 2M) carries a trypsin-like protease responsible for the PBA activity. This activity was determined by the Ig-turnover assay developed in our laboratories. The small molecular weight protease inhibitors, aprotinin (Trasylol, Bayer) and phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF), and the large molecular weight soybean trypsin inhibitor (SBTI) were used. These inhibitors did not affect the PBA activity of dextran sulfate of LPS. However, as expected, trypsin had a PBA-activity which was blocked by all of the above mentioned inhibitors. A trypsin-normal alpha 2M complex (Tr-N alpha 2M) and PBA activity which was inhibited by PMSF or aprotinin but not by SBTI. The PBA associated with Pt-alpha 2M was also inhibited by PMSF or aprotinin but not by SBTI. Moreover, the Tr-N alpha 2M complex and the Pt-alpha 2M, but not that from normal donors, had esterase activity for p-toluenesulfonyl-L-argininemethyl ester. These data suggest a similarity between the Pt-alpha 2M and Tr-N alpha 2M complex. Thus, we concluded that the esterolytic activity is sufficient for PBA activity, that Pt-alpha 2M has esterolytic activity and that this PBA activity can be blocked by small molecular weight protease inhibitors.