[Romanowsky染料とロマノフスキー・ギエムサ効果2 Eosin Y、Erythrosin B、Tetrachlorofluorescein、純粋な染料の分光特性、エオシンYの関連]

ロマノフスキー染料エオシンY、エリスロシンB、テトラクロロフルオレセインの分析的に純粋なサンプルが準備されています。染料サンプルのDCは、汚染を示しません。アルカリ水溶液中の色素ジアニオンの吸収スペクトルを、非常に低い色素濃度で95％エタノール中の色素酸の吸収スペクトルを測定しました。単量体染料種の長波長吸収のモル絶滅係数が決定されます（表1）。絶滅係数は、色素サンプルの標準化に使用できます。水溶液中のエオシンYの吸収スペクトルは、濃度に依存しています。新しい非常に敏感な方法を使用すると、スペクトルの濃度依存性から2つの関連性均衡を特定することができました。ダイマーは、非常に希釈溶液でも、高濃度の四量体で形成されます。293 K、pH = 12のモノマーMの二量体dの解離定数は、K21 = 2,9 x 10（-5）mです。ダイマーの四量体Qのd K42 = 2,4 x 10（-3）M。さまざまな濃度でのエオシン溶液の実験スペクトル、pH = 12、および平衡定数K21、K42純粋なモノマーの吸収スペクトル、二量体と四量体が計算されます。Mには、1つの長い波長吸収帯、VM = 19300 cm-1、Epsilon M = 1,03 x 10（5）M-1 cm-1;dまた、1つの吸収帯、VD = 19300 cm-1、Epsilon D = 1,74 x 10（5）M-1 cm-1;Q 2つの吸収帯、VQ1 = 19100、VQ2 = 20200 cm-1、Epsilon Q1 = 1,65 x 10（5）、Epsilon Q2 = 1,96 x 10（5）M-1 cm-1。二量体の吸収スペクトルは、量子力学によって議論されています。

Analytically pure samples of the Romanowsky dyes eosin y, erythrosin b and tetrachlorofluorescein are prepared. DC of the dye samples shows no contaminations. We measured the absorption spectra of the dye dianions in alkaline aqueous solution and of the dye acids in 95% ethanol at very low dye concentrations. The molar extinction coefficients of the long wavelength absorption of the monomeric dye species are determined (Table 1). The extinction coefficients may be used for standardisation of dye samples. The absorption spectra of eosin y in aqueous solution are dependent on concentration. Using a new very sensitive method it was possible to identify two association equilibria from the concentration dependency of the spectra. Dimers are formed even in very dilute solutions, at higher concentrations tetramers. The dissociation constant of the dimers D in monomers M at 293 K, pH = 12, is K21 = 2,9 X 10(-5) M; of the tetramers Q in dimers D K42 = 2,4 X 10(-3) M. From the experimental spectra of eosin solutions at various concentrations, pH = 12, and the equilibrium constants K21, K42 the absorption spectra of the pure monomers, dimers and tetramers are calculated. M has one long wavelength absorption band, VM = 19300 cm-1, epsilon M = 1,03 X 10(5) M-1 cm-1; D also one absorption band, VD = 19300 cm-1, epsilon D = 1,74 X 10(5) M-1 cm-1; Q two absorption bands, VQ1 = 19100, VQ2 = 20200 cm-1, epsilon Q1 = 1,65 X 10(5), epsilon Q2 = 1,96 X 10(5) M-1 cm-1. The absorption spectrum of the dimers is discussed by quantum mechanics.