刺激されたヒト単核細胞によって放出され、インターロイキン2（IL 2）、B細胞成長因子（BCGF）、およびインターロイキン1（IL 1）とは異なるマイトジェン性因子

2つのリンパ球のマイトジェン因子、インターロイキン2（IL 2）と芽球性因子（BF）は、ヒト混合リンパ球培養（MLC）で同時に生成されます。後者のマイトジェン性因子は、刺激されていないリンパ球に対して直接マイトジェン性ですが、前者のマイトジェン因子は以前に活性化されたリンパ球にのみ作用します。両方の要因にはM.W.がありました。ゲルろ過によって決定される範囲は18,000〜30,000です。したがって、これらの2つの要因は、M.W。に基づいて分離不可能でした。サイズ。しかし、BFとIL 2は、DEAEセルロースおよびフェニルセファロースクロマトグラフィーのイオン交換クロマトグラフィー中に分離可能でした。さらに、MLCの上清中のBF活性は5日目以降に最大に達しましたが、IL 2の活動は3日目にピークに達し、BFがIL 2と速度論的に区別されました。これらの結果は、BF活性がIL 2とは異なる分子によって媒介されることを明確に示しています。B細胞成長因子（BCGF）とBFの生化学的関係も調べられました。BFはCON A-SepharoseクロマトグラフィーによってBCGFから容易に分離できるため、BFはBCGFと区別できます。PHA刺激C3Hマウス胸腺細胞増殖の増強は、部分的に精製されたBFの調製に関連しておらず、BFとIL 1が異なる分子であることを示しています。まとめると、これらの結果は、BFがIL 2、BCGF、およびIL 1とは明らかに異なることを示しています。BF含有MLC上清は、T細胞とB細胞の両方で直接的なマイトジェン活性を持っています。TおよびB細胞の両方の芽球性活性は、硫酸アンモニウムの沈殿、ゲルろ過、DEAEセルロースイオン交換クロマトグラフィー、および疎水性クロマトグラフィー中にcop校で凝集しました。したがって、これらの2つのアクティビティは生化学的に分離不可能であるように見えます。ヒトIL 2の受容体を認識することが示唆されているモノクローナル抗TACは、BFのフェニルセファロース調製物に対するT細胞応答に対して高度に阻害されました（IL 2-Free）。対照的に、この抗体は、BF誘発B細胞増殖に最小限または影響を与えなかった。ただし、MLC上清をクローン化されたIL 2依存性T細胞株で吸収した場合、BF活性ではなくIL 2活性のみが除去され、BFとIL 2が異なる結合特異性を持っていることを示しています。抗TACがT細胞のBF誘導の増殖を阻害する正確なメカニズムは現在不明です。さらに、これらの実験の過程で、con a-sepharoseクロマトグラフィーは、BCGFをIL 2と分離する簡単なワンステップ方法として使用できることが観察されました。

Two lymphocyte mitogenic factors, interleukin 2 (IL 2) and blastogenic factor (BF), are generated concomitantly in human mixed lymphocyte cultures (MLC). The latter mitogenic factor is directly mitogenic for unstimulated lymphocytes, whereas the former mitogenic factor acts only on previously activated lymphocytes. Both factors had a m.w. range, as determined by gel filtration, of 18,000 to 30,000. Thus, these two factors were inseparable on the basis of m.w. size. However, BF and IL 2 were separable during ion exchange chromatography on the DEAE cellulose and phenyl-Sepharose chromatography. In addition, BF activity in the supernatants of MLC reached a maximum after day 5, whereas IL 2 activity peaked at day 3, thus distinguishing BF from IL 2 kinetically. These results clearly indicate that BF activity is mediated by molecules distinct from IL 2. The biochemical relationship between B cell growth factor (BCGF) and BF was also examined. Because BF was readily separable from BCGF by Con A-Sepharose chromatography, BF is distinguishable from BCGF. No augmentation of PHA-stimulated C3H mouse thymocyte proliferation was associated with the preparation of partially purified BF, demonstrating that BF and IL 1 are distinct molecules. Taken together, these results indicate that BF is clearly distinct from IL 2, BCGF, and IL 1. BF-containing MLC supernatants have direct mitogenic activity on both T and B cells. Both T and B cell blastogenic activities copurified during ammonium sulfate precipitation, gel filtration, DEAE cellulose ion exchange chromatography, and hydrophobic chromatography. Thus, these two activities appear to be biochemically inseparable. Monoclonal anti-Tac, that has been suggested to recognize the receptor for human IL 2, was highly inhibitory to the T cell response to the phenyl-Sepharose preparations of BF (IL 2-free). In contrast, this antibody had minimal or no effect on BF-induced B cell proliferation. However, when MLC supernatants were absorbed with a cloned IL 2-dependent T cell line, only IL 2 activity, but not BF activity, was removed, demonstrating that BF and IL 2 have different binding specificities. The precise mechanism(s) by which anti-Tac inhibits BF-induced proliferation of T cells is unknown at present. Additionally, during the course of these experiments, we observed that Con A-Sepharose chromatography could be used as a simple one-step method of separating BCGF from IL 2.