エプスタインバーウイルスによるヒトBリンパ球の感染における初期イベント：内在化プロセス

Epstein-Barr Virus（EBV）による正常なBリンパ球およびBリンパ芽球細胞の感染の初期イベントは、電子および免疫電子顕微鏡検査および感染性および阻害研究によって検査されました。精製されたEBVは4度で細胞表面に残り、50 nmのエンベロープ投影を介して細胞膜と接触している250 nmの卵形粒子として現れました。正常なBリンパ球のEBVの大きな（300〜500 nm）非耐熱性細胞への内在化は、37度で2〜5分以内に開始されました。この段階では、細胞関連ウイルスの約1/3が細胞の浸潤に配置され、別の1/3が細胞液胞子にありました。EBVと外部細胞膜の直接融合は観察されませんでした。代わりに、37度で15〜30分以内に大きなエンドサイトーシス小胞からウイルスの除蒸着とヌクレオカプシド輸送が発生し、リソソーム酵素は関与しませんでした。この間、ウイルスエンベロープはアモルファスになり、ヌクレオカプシドからの分離が明らかでした。37度で60〜90分後、ウイルスヌクレオカプシドを細胞核に近接して視覚化しました。クロロキン、メチルアミン、塩化アンモニウムなどの弱い塩基は、エンドサイトーシス液胞内のウイルスの除蒸着と融合を遅らせ、ウイルス感染性の廃止と細胞液胞内の無傷のビリオンの蓄積をもたらしました。これらの研究は、EBVが細胞に入るために、多くのウイルスを含む多くのウイルスを含む他の多くのリガンドによって利用されたクラスリン - レプトソーム - リソソーム経路とは異なるエンドサイトーシス経路によって正常なBリンパ球に入ることを示しています。正常なBリンパ球への侵入の経路とは対照的に、EBVは37度で2〜5分以内に外部細胞膜との直接融合によりBリンパ芽球細胞に入りました。

The early events in the infection of normal B lymphocytes and B lymphoblastoid cells by Epstein-Barr virus (EBV) were examined by electron and immunoelectron microscopy and by infectivity and inhibition studies. Purified EBV remained on the cell surface at 4 degrees and appeared as 250-nm ovoid particles in contact with the cell membrane through 50-nm envelope projections. Internalization of EBV in normal B lymphocytes into large (300-500 nm) uncoated vacuoles was initiated within 2 to 5 min at 37 degrees. At this stage approximately 1/3 of cell-associated virus was located in cellular invaginations while another 1/3 was in cell vacuoles. Direct fusion of EBV with the outer cell membrane was not observed. Instead, viral deenvelopment and nucleocapsid transit into the cytoplasm occurred from the large endocytic vesicles within 15 to 30 min at 37 degrees and did not involve lysosomal enzymes. During this time, the viral envelope became amorphous and its separation from the nucleocapsid was evident. After 60 to 90 min at 37 degrees, viral nucleocapsids were visualized in close proximity to the cell nucleus. Weak bases such as chloroquine, methylamine, and ammonium chloride retarded viral deenvelopment and fusion inside the endocytic vacuoles, resulting in abrogation of viral infectivity and accumulation of intact virions within cell vacuoles. These studies indicate that EBV enters normal B lymphocytes by a different endocytic pathway than the clathrin-receptosome-lysosome pathway utilized by many other ligands, including a number of viruses, to enter cells. In contrast to the pathway of entry into normal B lymphocytes, EBV entered B lymphoblastoid cells by direct fusion with the outer cell membrane within 2 to 5 min at 37 degrees.