デスモプラキンIおよびIIの生化学的および免疫学的特性、デスモソームプラークの主要なポリペプチド

上皮細胞には、対称接合部、すなわちデスモソーム、または非対称のヘミスモソームとして現れる血漿膜の特定のドメインを持つサイトケラチンフィラメント（トノフィラメント）の複合体が含まれています。フィラメント膜吸収のこれらの領域は、14〜20 nmの厚さの濃いプラーク（デスモソームプラーク）によって特徴付けられます。隔離されたデスモソームトノフィラメント複合体またはさまざまな層状扁平上皮（例：ウシ銃口と舌粘膜）デスモソームプラーク構造からの他のデスモソーム画分が認識され、さまざまな抽出バッファーおよび洗剤に対する比較的高い耐性を示します。デスモソームプラーク材料に濃縮されたこのような画分は、2次元ゲル電気泳動、2つの異なるポリペプチドアイソエレクトリニュートラルpHなど、2次元ゲル電気泳動である250,000（デスモプラキンI）と215,000（デスモプラキンII）の見かけの分子量（デスモプラキンI）と215,000（デスモプラキンII）の2つの顕著なポリペプチドバンドにも濃縮されています。これらの2つのポリペプチドはほぼ等モル量で存在し、それらはそれぞれ、組織スライスの[32p]リン酸塩で標識されたものを含む一連の等電気変異体として現れます。2つのデスモプラキンポリペプチドは、トリプシンペプチドマップ分析によって示されるように密接に関連しており、ケラチン様タンパク質やデスモソームが豊富な画分の他の主要なポリペプチドとは異なります。デスモプラキンに対して飼育され、これらのタンパク質に特異的なモルモット抗体は、他のデスモソーム抗原または他のタイプの接合部の構成要素と交差反応しません。デスモプラキン抗体を使用して、デスモプラキンを、多様な種の上皮および心筋細胞に存在するデスモソームプラークの主要成分として特定しました。このグループの細胞型特異的膜関連の細胞骨格タンパク質とその可能な細胞骨格機能の重要性について説明します。

Epithelial cells contain complexes of cytokeratin filaments (tonofilaments) with specific domains of the plasma membrane that appear as symmetric junctions, i.e. desmosomes, or as asymmetric hemi-desmosomes. These regions of filament-membrane-attachment are characterized by 14 to 20 nm thick dense plaques (desmosomal plaque). In isolated desmosome-tonofilament complexes or other desmosomal fractions from various stratified squamous epithelia (e.g. bovine muzzle epidermis and tongue mucosa) desmosomal plaque structures are recognized and show a relatively high resistance to various extraction buffers and detergents. Such fractions enriched in desmosomal plaque material are also enriched in two prominent polypeptide bands of apparent molecular weights 250,000 (desmoplakin I) and 215,000 (desmoplakin II) which appear, on two-dimensional gel electrophoresis, as two distinct polypeptides isoelectric near neutral pH. These two polypeptides are present in almost equimolar amounts and each of them appears as a series of isoelectric variants, including some labeled by [32P]phosphate in tissue slices. The two desmoplakin polypeptides are closely related as shown by tryptic peptide map analysis and are different from keratin-like proteins and other major polypeptides of desmosome-rich fractions. Guinea pig antibodies raised against desmoplakins and specific for these proteins do not cross-react with other desmosomal antigen(s) or constituents of other types of junctions. Using desmoplakin antibodies we have identified desmoplakins as the major constituents of the desmosomal plaques present in epithelial and myocardiac cells of diverse species. The significance of this group of cell type-specific membrane-associated cytoskeletal proteins and their possible cytoskeletal functions are discussed.