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すると翻訳の精度が向上します
ポリエチレングリコール沈殿による大腸菌プラスミドDNAの分離と精製の手順について説明します。この方法は、迅速で、シンプルで、安価で、小規模および大規模な操作の両方に適しています。この手順には、ドデシル硫酸ナトリウム中のプロナゼによる処理による細菌細胞の溶解、遠心分離による染色体DNAの除去、ポリエチレングリコールによる残留核酸の沈殿、およびLICLによる沈殿によるRNAの除去が含まれます。記載されているように精製されたプラスミドDNAは、制限エンドヌクレアーゼ分析、cDNAまたは合成DNAのクローニングのベクターとして使用する、または大腸菌転写翻訳細胞のないシステムのテンプレートとして使用するために十分に純粋です。
ポリエチレングリコール沈殿による大腸菌プラスミドDNAの分離と精製の手順について説明します。この方法は、迅速で、シンプルで、安価で、小規模および大規模な操作の両方に適しています。この手順には、ドデシル硫酸ナトリウム中のプロナゼによる処理による細菌細胞の溶解、遠心分離による染色体DNAの除去、ポリエチレングリコールによる残留核酸の沈殿、およびLICLによる沈殿によるRNAの除去が含まれます。記載されているように精製されたプラスミドDNAは、制限エンドヌクレアーゼ分析、cDNAまたは合成DNAのクローニングのベクターとして使用する、または大腸菌転写翻訳細胞のないシステムのテンプレートとして使用するために十分に純粋です。
A procedure is described for the isolation and purification of E. coli plasmid DNA by polyethylene glycol precipitation. The method is rapid, simple, inexpensive and amenable to both small and large scale manipulation. This procedure involves lysis of bacterial cells by treatment with pronase in sodium dodecyl sulfate, removal of chromosomal DNA by centrifugation, precipitation of residual nucleic acids with polyethylene glycol and removal of RNA by precipitation with LiCl. Plasmid DNA purified as described is pure enough for restriction endonuclease analysis, for use as a vector for the cloning of cDNA or synthetic DNA, or for use as a template in an E. coli transcription-translation cell-free system.
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