逆溶血プラークアッセイを使用して、混合集団における個々の細胞からのホルモン放出の検出

混合下垂体細胞培養におけるプロラクチン（PRL）分泌細胞は、PRL対イサリンと補完の存在下で、ブドウ球菌タンパク質A-コーティングされたオービンエリスロサイトと一緒に単層でインキュベートした場合、顕微鏡的に識別可能なプラーク（乳腺の周りの溶血のゾーン）を形成します。プラークは15〜30分で最初に形成され、サイズが最大、2時間で数が最大です。これらの条件下では、アデノヒポフィフ細胞の約70％がプラークを形成します。TRHが増加し、ドーパミンが減少し、インキュベーション中の早い時期にプラークのサイズと数が減少します。この逆溶血プラークアッセイは、おそらく抗体が利用可能な細胞分泌を検出するために使用できます。この手法、または同定された細胞で連続的なプラークアッセイが実行される修正バージョン - 免疫細胞化学、オートラジオグラフィー、またはそれらの細胞の電子顕微鏡とともに使用される - は、分泌システムに関する一般的に尋ねられる質問に対するより良い答えを提供するでしょう。同じホルモンを含む細胞のサブセットのみが、特定のセクターゴーグに反応しますか？2つのホルモンを含む細胞は、そのうちの1つを優先的に放出できますか？

Prolactin (Prl) secreting cells in a mixed pituitary cell culture form microscopically-identifiable plaques (zones of hemolysis around the lactotropes) when incubated in a monolayer with staphylococcal protein-A-coated ovine erythrocytes in the presence of Prl antiserum and complement. Plaques form first at 15-30 min and are maximal in size and number at 2 h. Approximately 70% of the adenohypophyseal cells form plaques under these conditions. TRH increases, and dopamine decreases, the size and number of plaques at early times during incubation. This reverse hemolytic plaque assay probably can be used to detect any cell secretion for which an antibody is available. This technique, or a modified version of it in which sequential plaque assays are performed on identified cells--used together with immunocytochemistry, autoradiography or electron microscopy of those cells--should provide better answers to commonly asked questions about secretory systems: Do all or only a subset of cells containing the same hormone respond to a particular secretagogue? Can cells that contain two hormones release one of them preferentially?