[分泌された酵素の構造遺伝子であるSACBの遺伝的分析、Bacillus subtilis Marburgのレバンシュクラーゼ]

分泌された酵素であるB. subtilis levansucraseをコードする構造遺伝子SACBは、大腸菌で発現します。SACB遺伝子の大腸菌宿主は、スクロースによって毒されます。この特性により、クローン化された遺伝子に影響を受ける変異体の強力な選択が可能になりました。プラスミディン変異は、B。subtilis染色体に容易に導入されました。SACBに拡張されたさまざまな削除を持つプラスミドのコレクションを使用して、B。subtilisの染色体におけるプラスミド統合に基づいた削除マッピングの技術を開発しました。この手法の一般化について説明します。

The structural gene sacB encoding B. subtilis levansucrase, a secreted enzyme, expresses in E. coli. E. coli hosts of the sacB gene are poisoned by sucrose. This property allowed a powerful selection of mutants affected in the cloned gene. The plasmidic mutations were readily introduced in the B. subtilis chromosome. Using a collection of plasmids bearing various deletions extending in sacB we developed a technique of deletion mapping based on plasmid integration in the chromosome of B. subtilis. A generalization of this technique is discussed.