ビオチン化ハプチン - アビジン複合体の免疫原性

抗ハプテン抗体の生成のための担体としてのアビジンの有効性は、ビオチンとエプシロンジニトロフェニル（DNP）リジン残基を含むアビジンと合成ペプチドの複合体との免疫により、マウスで評価されました。合成ハプテンは、ビオチン部分とDNP-リジン部分の間のスペーサーとして、0、1、または2つの6-アミノカプロイル基で構築されました。スペーサーのない複合体は抗DNP抗体応答を誘導しませんでしたが、2つのスペーサーを持つものは1つのスペーサーのみを持つものよりも強い応答を誘導しました。しかし、アビジン - ビオチン化ハプテン複合体に対する抗DNP応答は、従来のハプテンタンパク質コンジュゲート（DNP-Ovalbumin）に対する反応よりもかなり弱かった。アビジン - ビオチン-6-アミノカプロイル - エプシロン - リジン - アラニンとDNP-オバブミンに産生された抗DNP抗体におけるアイソタイプの分布は類似していたが、前者の抗原は（CBA/N X BALBの抗体のレベルが有意に低い抗体のレベルが有意に低いことを誘発した。/c）dnp-ovalbumingとは対照的に、表現型の正常な雌の同腹仔よりもxid欠損を伴うF1雄マウス、およびNu/Nuマウスの有意な反応も誘導しました。これらの発見は、おそらく分子の四量体構造のために、アビジン - ビオチン複合体に対する応答には、少なくとも「T非依存性」または「T効率の高い」成分があることを示唆しています。ビオチンの受容体部位の深さの推定値は、複合体を使用してDNPタンパク質でコーティングされたプレートへの抗DNP抗体の結合を競合的に阻害することにより得られました。所見は、免疫原性に関するデータ（抗DNP抗体応答を誘導する能力）と一致し、受容体部位の深さは16-26 Aのことを示唆しました。

The efficacy of avidin as a carrier for the generation of anti-hapten antibodies was assessed in mice by immunization with complexes of avidin and synthetic peptides containing biotin and an epsilon-dinitrophenyl (DNP) lysine residue. The synthetic haptens were constructed with 0, 1 or 2 6-aminocaproyl groups as spacers between the biotin and DNP-lysine moieties. Complexes without a spacer did not induce anti-DNP antibody responses, while those with two spacers induced stronger responses than those with only one spacer. However, the anti-DNP responses to avidin-biotinylated hapten complexes were considerably weaker than responses to a conventional hapten-protein conjugate (DNP-ovalbumin), and, like "T-independent" antigens, failed to induce significant immunological memory. The distribution of isotypes in the anti-DNP antibodies produced to avidin-biotin-6-aminocaproyl-epsilon-DNP-lysine-alanine and DNP-ovalbumin was similar, but the former antigen induced significantly lower levels of antibody in (CBA/N X BALB/c) F1 male mice with the xid defect than in phenotypically normal female littermates, and also induced significant responses in nu/nu mice, in contrast to DNP-ovalbumin. These findings suggest that there is at least a "T-independent" or "T-efficient" component in the response to avidin-biotin complexes, perhaps due to the tetrameric structure of the molecule. Estimates of the depth of the receptor site for biotin were obtained by using the complexes to competitively inhibit the binding of anti-DNP antibody to plates coated with DNP-protein. The findings were consonant with the data on immunogenicity (capacity to induce anti-DNP antibody responses) and suggested that the receptor site has a depth of 16-26 A.