培養されたヒト皮膚線維芽細胞におけるグリコサミノグリカン合成のデキサメタゾン調節グルココルチコイドと甲状腺ホルモンの同様の効果

グリコサミノグリカンの蓄積に対するデキサメタゾンの効果は、in vitroでのコンフルエントなヒト皮膚線維芽細胞で調べられました。グルココルチコイドは、収穫の72時間前に培地に添加すると、酢酸または[3H]グルコサミンのいずれかがヒアルロン酸塩への[3H]または[3H]グルコサミンへの取り込みを一貫して阻害しました。この効果は、約1 nmで半軸で、5〜10 nmで最大でした。阻害はホルモンの添加から5時間以内に発生し、25時間まで最大値に近い。11アルファヒドロコルチゾン（10 nM）、デオキシコルチコステロン（10 nM）、およびプロゲステロン（100 nM）は、この蓄積を阻害できませんでした。しかし、高濃度の既知のグルココルチコイド拮抗薬であるプロゲステロン（2 microM）は、デキサメタゾンに対する反応を57％減衰させる可能性があります。培養物をパルス標識した後、最大68時間インキュベートしました。[3H]ヒアルロン酸分解の速度に、ステロイド治療培養では示されることはありませんでした。トリオヨードチロニン（T3）は、線維芽細胞におけるヒアルロン酸塩の合成も阻害する可能性があります（Smith、T。J.、Y。Murata、A。L。Horwitz、L。Philipson、およびS. Refetoff、1982、J。Clin。Invest。、70：1066-1073）。T3とデキサメタゾンの両方は、用量依存的にグリコサミノグリカンの蓄積を阻害する可能性があります。最大T3効果は、1 nmで、10 nMでデキサメタゾンの最大効果を達成しました。T3の飽和濃度とデキサメタゾンのみを添加したのは、それぞれ[3H]ヒアルロン酸塩を54％と49％阻害しました。両方のホルモンを添加すると、蓄積を84％阻害しました。デキサメタゾンは、時間における[3H]ヒアルロン酸蓄積、用量依存的、およびステレオ固有の方法を阻害します。グリコサミノグリカン分解の速度は影響を受けなかったため、ステロイドは高分子合成の速度を阻害しました。この効果は、グルココルチコイド受容体を介して媒介される可能性があります。皮膚線維芽細胞のヒアルロン酸合成は、異なる経路を介してグルココルチコイドとT3の両方によって調節されているようです。

The effects of dexamethasone on glycosaminoglycan accumulation were examined in confluent human skin fibroblasts in vitro. The glucocorticoid consistently inhibited the incorporation of either [3H]acetate or [3H]glucosamine into hyaluronate when added to culture medium 72 h before harvest. This effect was half-maximal at approximately 1 nM and maximal at 5-10 nM. Inhibition occurred within 5 h of hormone addition and was near maximal by 25 h. 11 alpha-hydrocortisone (10 nM), deoxycorticosterone (10 nM), and progesterone (100 nM) failed to inhibit this accumulation; however, progesterone (2 microM), a known glucocorticoid antagonist at high concentration, could attenuate the response to dexamethasone by 57%. Cultures were pulse-labeled and then chase incubated for up to 68 h. No difference in the rate of [3H]hyaluronate degradation could be demonstrated in steroid-treated cultures. Triiodothyronine (T3) can also inhibit synthesis of hyaluronate in fibroblasts (Smith, T. J., Y. Murata, A. L. Horwitz, L. Philipson, and S. Refetoff, 1982, J. Clin. Invest., 70:1066-1073). Both T3 and dexamethasone could inhibit glycosaminoglycan accumulation in a dose-dependent manner. Maximal T3 effects were achieved at 1 nM and those of dexamethasone at 10 nM. Saturating concentrations of T3 and dexamethasone added alone inhibited [3H]hyaluronate by 54 and 49%, respectively. When both hormones were added, accumulation was inhibited by 84%. Dexamethasone inhibits [3H]hyaluronate accumulation in a time, dose-dependent, and stereo-specific manner. The rate of glycosaminoglycan degradation was unaffected, and thus, the steroid inhibited the rate of macromolecular synthesis. This effect was likely mediated through glucocorticoid receptors. Hyaluronate synthesis in skin fibroblasts appears to be regulated by both glucocorticoids and T3 through different pathways.