[変異体プラスミドを運ぶPseudomonas putida株によるナフタレン酸化]

シュードモナス・プチダの親株および変異株によるナフタレンの酸化を研究した。親株には、ナフタレンからサリチル酸への酸化を制御し、サリチル酸を酸化することができるプラスミド NPL-1 が含まれていました。この変異株はサリチル酸ヒドロキシラーゼの変異によりサリチル酸を酸化しなかった。それには、ナフタレンオキシゲナーゼの構成的合成を決定する変異体プラスミド NPL-41 も含まれていました。野生株の培養液中にナフタレン異化作用の生成物として蓄積したサリチル酸は、増殖する細胞集団によってさらに酸化を受けることが判明した。変異株の培養液中のサリチル酸含有量は最大値に達し、その後は一定のままであった。サリチル酸によるナフタレンオキシゲナーゼの阻害を防止し、サリチル酸の収率を高めるために、陰イオン交換樹脂がテストされました。変異体プラスミド NPL-41 の伝染性の性質により、結合を利用して、この化合物をさらに分解することなくナフタレンをサリチル酸に酸化するシュードモナス株を構築することが可能になります。

Naphthalene oxidation by a parent and a mutant strain of Pseudomonas putida was studied. The parent strain contained a plasmid NPL-1 which controlled oxidation of naphthalene to salicylic acid and was capable of oxidizing salicylate. The mutant strain did not oxidize salicylate because of a mutation in salicylate hydroxylase; it contained also a mutant plasmid NPL-41 which determined constitutive synthesis of naphthalene oxygenase. Salicylic acid which accumulated as a product of naphthalene catabolism in the cultural broth of the wild strain was found to undergo further oxidation by the population of growing cells. The content of salicylic acid in the cultural broth of the mutant strain reached maximum and then remained constant. An anion-exchange resin was tested in order to prevent the inhibition of naphthalene oxygenase by salicylate and to increase the yield of salicylic acid. The transmissible character of the mutant plasmid NPL-41 makes it possible, with the aid of conjugation, to construct Pseudomonas strains which would oxidize naphthalene to salicylic acid without further degradation of this compound.