老化tRNAの機能と忠実度：in vivoアシル化、アナログ識別、シンテターゼ結合、およびin vitro翻訳

バリンとリジンの肝臓移動RNAは、周期酸化によって判断されるように、雄のスプラグドーリーラットの4ヶ月および24ヶ月で完全にアシル化されました。ラット肝臓からのtRNA集団全体のin vitroアシル化能力は減少しますが、これは明らかにin vivoで有害ではありません。いくつかのハロゲン化フェニルアラニンが合成され、フェニルアラニンのアシル化能力への効果が調べられました。若い（3か月）および古い（24か月）TRNAに結合したシンテターゼは、p-クロロフェニルアラニンと本物のフェニルアラニンを異なって識別しました。若いtRNAを含むシンテターゼは、古いtRNAよりも識別することができませんでした。古いラットの精製されたTrnapheは、精製されたフェニルアラニルTRNAシンテターゼおよび若いTRNAPHEに紫外線誘発架橋を形成しませんでした。脳脊髄炎ウイルス、ヘモグロビン、および卵形のmRNAのin vitro翻訳は効果的であり、幼いまたは古いスプラグ・ドーリーまたはフィッシャー344ラット肝臓のTRNAを使用しましたが、古いtRNAが供給されると、単位tRNAあたりの合成された製品が減少しました。すべてのタンパク質産物は、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動によって示されるように、すべてのTRNAで合成されました。TRNAは、老化したラットの肝臓で正常な機能が可能であり、おそらく修飾が不足しており、タンパク質誤差を生成する可能性は低いと結論付けています。

The liver transfer RNAs for valine and lysine were completely acylated in vivo, as judged by periodate oxidation, at 4 and 24 months of age in male Sprague-Dawley rats. In vitro acylation capacity for whole tRNA populations from rat livers is decreased, but this is evidently not deleterious in vivo. Several halogenated phenylalanines were synthesized and their effects upon acylation capacity for phenylalanine were examined. Synthetases bound to young (3 month) and old (24 month) tRNAs discriminated differently between p-chlorophenylalanine and authentic phenylalanine; synthetase with young tRNA was less able to discriminate than with old tRNA. Purified tRNAphe from old rats did not form ultraviolet-induced crosslinks to purified phenylalanyl tRNA synthetase as well as young tRNAphe. In vitro translation of encephalomyocarditis virus, hemoglobin, and ovalbumin mRNAs was effective, using tRNAs of young or old Sprague-Dawley or Fischer 344 rat livers, although, when the old tRNA was supplied, the product synthesized per unit tRNA was reduced. All of the protein products were synthesized with all tRNAs, as shown by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. We conclude that tRNA is capable of normal functions in livers of aging rats, is probably modification deficient, and is unlikely to produce protein errors.