バンコマイシンを監視するための自動化された蛍光分極免疫アッセイ

蛍光偏光免疫測定（FPIA）技術を拡張して、薬物の測定にして、複雑な両性糖ペプチド抗生物質バンコマイシン（Molecular Meiwe、1,449）を含むようにしました。フルオレセイン標識バンコマイシンはトレーサーとして使用され、バンコマイシンに特異的な抗血清が従来の手順によりウサギで育てられました。トレーサー、サンプル、および希釈抗血清を結合し、トレーサー蛍光の偏光を特別に設計した蛍光計（Abbott TDX）で決定します。機器の設計により、蛍光干渉の可能性が最小限に抑えられます。アッセイは、わずか0.6 mg/Lのバンコマイシンを測定でき、溶血、脂肪症、ビリルビン、およびタンパク質濃度の変化からの干渉がありません。アッセイ内の変動係数は3％（n = 5）であり、アッセイ間は5％（n = 5）でした。FPIAアッセイ（TDXバンコマイシン）は、バンコマイシンの液体クロマトグラフィック（LC）アッセイと、98の臨床標本の市販の無線免疫アッセイ（RIA）と比較されました。線形最小二乗回帰分析により、式FPIA = 1.09 LC + 3.04から0.980のLCの相関係数が得られ、式FPIA = 1.036 RIA + 1.66から0.957のRIAの相関係数が得られました。

We have extended fluorescence polarization immunoassay (FPIA) technology for the measurement of drugs to include the complex amphoteric glycopeptide antibiotic vancomycin (molecular weight, 1,449). Fluorescein-labeled vancomycin was employed as a tracer, and antisera specific for vancomycin were raised in rabbits by conventional procedures. Tracer, sample, and diluted antiserum were combined, and the polarization of tracer fluorescence is determined in a specially designed fluorometer (Abbott TDx). Because of instrument design, the possibility of fluorescent interferences is minimized. The assay can measure as little as 0.6 mg/L of vancomycin and is free of interferences from hemolysis, lipemia, bilirubin, and changes in protein concentration. The coefficient of variation within assay was 3% (n = 5) and between assays was 5% (n = 5). The FPIA assay (TDx Vancomycin) was compared to a liquid chromatographic (LC) assay for vancomycin and to a commercially available radioimmunoassay (RIA) for 98 clinical specimens. A linear least-squares regression analysis gave a correlation coefficient for LC of 0.980 from the equation FPIA = 1.09 LC + 3.04, and a correlation coefficient for RIA of 0.957 from the equation FPIA = 1.036 RIA + 1.66.