家族性アミロイドティック多筋障害におけるアミロイドフィブリルタンパク質、トランスシレチン（Prealbumin）の分子異常のポルトガル型定義の定義

家族性アミロイドティック多発性多発性症状の患者におけるアミロイドフィブリルタンパク質は、通常プレアルブミンと呼ばれる血漿タンパク質であるトランスシレチン（TTR）に化学的に関連していることが知られています。遺伝的に異常なTTRがこの疾患に関与している可能性があります。家族性アミロイドーシスで死亡した2人のポルトガル患者の組織から分離されたアミロイドフィブリルタンパク質（AFP）、およびこの疾患の患者の血清から分離されたTTRについて研究が実施されました。AFPは、セファロースに関連するレチノール結合タンパク質のアフィニティクロマトグラフィーによって精製され、安定した四量体構造の形成において血漿TTRに似ており、サイロキシンとレチノール結合タンパク質の両方の結合親和性に似ています。構造研究には、次のものが含まれます。（a）トリプシン消化後の逆相高性能液クロマトグラフィ（HPLC）による比較ペプチドマッピング。（b）臭化シアンの切断研究。（c）選択されたトリプチンおよびCNBRペプチドのアミノ酸微小シーケンス分析。TTRの既知のアミノ酸配列に基づいて、比較トリプシンペプチドマップは、TTRと比較してAFPにおける単一の異常なトリプチスペプチド（ペプチド4、残基22-34）の存在を示しました。この異常なペプチドには、正常なトリプチンペプチド4には存在しないメチオニン残基が含まれていました。AFPのCNBR切断は、HPLC分析によってそれぞれ実証された2つの余分なペプチドフラグメントを生成しました。シーケンス分析では、TTRと比較してAFPの位置30でのメチオニンの出力置換の存在が示されました。したがって、精製されたアミロイドフィブリルタンパク質は、30の位置にメチオニンとスターバリンの置換を伴うTTRバリアントを構成しました。バリン30の可能性のあるコドンの単一のヌクレオチド変化は、置換を説明できます。バリアントTTRは、アミロイドーゼ患者のプールされた血清から分離されたTTRにも存在し、通常のTTRの量が多い（4〜6倍）。したがって、これらの患者では、バリアントTTRは血漿で循環し、より多くの正常なTTRが循環していました。バリアントTTRは、疾患の特定の生化学的原因を表し、この異常な形態のTTRが疾患のアミロイド特性として組織に選択的に堆積することを示唆しています。

Amyloid fibril protein in patients with familial amyloidotic polyneuropathy is known to be chemically related to transthyretin (TTR), the plasma protein that is usually referred to as prealbumin. A genetically abnormal TTR may be involved in this disease. Studies were conducted on amyloid fibril protein (AFp) isolated from tissues of two Portuguese patients who died with familial amyloidosis, and on TTR isolated from sera of patients with this disease. AFp, purified by affinity chromatography on retinol-binding protein linked to Sepharose, resembled plasma TTR in forming a stable tetrameric structure, and in its binding affinities for both thyroxine and retinol-binding protein. The structural studies included: (a) comparative peptide mappings by reverse-phase high performance liquid chromatography (HPLC) after trypsin digestion; (b) cyanogen bromide cleavage studies; and (c) amino acid microsequence analysis of selected tryptic and CNBr peptides. On the basis of the known amino acid sequence of TTR, comparative tryptic peptide maps showed the presence of a single aberrant tryptic peptide (peptide 4, residues 22-34) in AFp as compared with TTR. This aberrant peptide contained a methionine residue, not present in normal tryptic peptide 4. CNBr cleavage of AFp produced two extra peptide fragments, which were demonstrated, respectively, by HPLC analysis and by sodium dodecyl sulfate-gel electrophoresis. Sequence analyses indicated the presence of a methionine-for-valine substitution at position 30 in AFp as compared with TTR. Thus, the purified amyloid fibril protein comprised a TTR variant with a methionine-forvaline substitution at position 30. A single nucleotide change in a possible codon for valine 30 could explain the substitution. The variant TTR was also present in the TTR isolated from the pooled sera of amyloidoses patients, together with larger (four- to six-fold) amounts of the normal TTR. Thus, in these patients, the variant TTR was circulating in plasma, along with larger amounts of normal TTR. We suggest that the variant TTR represents the specific biochemical cause of the disease, and that this abnormal form of TTR selectively deposits in tissues as the amyloid characteristic of the disease.