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Preparative biochemistry19810101Vol.11issue(2)

アルブミンに対する放射性異常と蛍光標識の効果

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

フルオレスカミン - 、フルオレセインイソチオシアネート(FITC) - 、および放射性ヨウ素標識ウシ血清アルブミンの調製と特性評価は批判的に評価されています。電気泳動移動度とイオン交換クロマトグラフィーは、共役およびスルフヒドリル含有量の尺度とともに、共役による変化を評価するために使用されます。フルオレスカミンの標識は、クロマトグラフィーの挙動と電気泳動移動性の劇的な変化をもたらします。FITC標識は、クロマトグラフィーおよび電気泳動特性にも有意な変化をもたらします。放射性ヨウ素化は、電気泳動特性にほとんどまたはまったく変化することなく、クロマトグラフィー特性とスルフヒドリル基の酸素のわずかな変化につながります。3つのラベルはすべて、ある程度の安定性があり、大規模な初期精製の後でも、時間とともに自由ラベルのレベルが上昇しています。ここで使用される2つの蛍光ラベルと、おそらくここで使用される放射性ヨウ素標識法は、固形液体界面での吸着など、BSAの特定の研究には適さないと結論付けられています。

フルオレスカミン - 、フルオレセインイソチオシアネート(FITC) - 、および放射性ヨウ素標識ウシ血清アルブミンの調製と特性評価は批判的に評価されています。電気泳動移動度とイオン交換クロマトグラフィーは、共役およびスルフヒドリル含有量の尺度とともに、共役による変化を評価するために使用されます。フルオレスカミンの標識は、クロマトグラフィーの挙動と電気泳動移動性の劇的な変化をもたらします。FITC標識は、クロマトグラフィーおよび電気泳動特性にも有意な変化をもたらします。放射性ヨウ素化は、電気泳動特性にほとんどまたはまったく変化することなく、クロマトグラフィー特性とスルフヒドリル基の酸素のわずかな変化につながります。3つのラベルはすべて、ある程度の安定性があり、大規模な初期精製の後でも、時間とともに自由ラベルのレベルが上昇しています。ここで使用される2つの蛍光ラベルと、おそらくここで使用される放射性ヨウ素標識法は、固形液体界面での吸着など、BSAの特定の研究には適さないと結論付けられています。

The preparation and characterization of fluorescamine -, fluorescein isothiocyanate (FITC) -, and radioiodine-labelled bovine serum albumin is critically evaluated. Electrophoretic mobility and ion-exchange chromatography, together with measures of degree of conjugation and sulfhydryl content, are used to assess the changes due to conjugation. Fluorescamine labelling results in drastic changes in chromatographic behavior and electrophoretic mobility. FITC labelling also results in significant changes in chromatographic and electrophoretic properties. Radioiodination leads to minor changes in chromatographic properties and oxydation of sulfhydryl groups, with little or no change in electrophoretic properties. All three labels have some degree of lability and show increased levels of free label with time, even after extensive initial purification. It is concluded that the two fluorescent labels and possibly the radioiodine labelling method used here are unsuitable for certain studies of BSA, such as its adsorption at solid-liquid interfaces.

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