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ヒト血漿におけるアポリポタンパク質A-I(ApoA-I)の放射性免疫測定法の2つの技術について説明します。それぞれが非イオン性洗剤であるTween-20の使用を含み、抗原性部位を露出させ、「IgG Sorb」(殺害されたスタフィロコッ科の懸濁液の懸濁液を含む1つの技術を説明します。)固相分離器として。Tween-20(3.75 g/L)は非特異的結合を減少させ、ApoA-IとApoA-I抗体の間の結合親和性を変えることなく、退屈な輝度処置と同じ程度まで、血漿中のApoA-I分子の抗原性部位をマスクしませんでした。スキャッチャード分析によって決定されているとおり(KAは2.83 x 10(8)L/molに合わせて一致します)。縛られていない無吸収の125i標識ApoA-Iを分離するための広く受け入れられている二重抗体免疫沈降技術は、延長されたインキュベーションと遠心分離IgG SORBが、未圧剤125i標識APOA-Iと反応が完全に分離されているため、長期間のインキュベーションと遠心分離IgG SORBが効果的に分離されているため、時間がかかります。10分以内。従来の第2抗体(Y)および固相IgG SORBメソッド(X)によるヒト血漿中のApoA-Iの濃度を比較すると、2つの手法による結果が合理的に同一であることがわかりました(r = 0.98、Y = 1.2x-0.17)。65の正常および5人の高脂血症患者からの血漿中のApoA-Iの平均濃度は、それぞれ1.33(SD 0.32)および0.78(SD 0.35)G/Lであり、ApoA-Iおよび高密度リポタンパク質コレステロールは有意に相関していた(r =0.72、p少ない0.001)。
ヒト血漿におけるアポリポタンパク質A-I(ApoA-I)の放射性免疫測定法の2つの技術について説明します。それぞれが非イオン性洗剤であるTween-20の使用を含み、抗原性部位を露出させ、「IgG Sorb」(殺害されたスタフィロコッ科の懸濁液の懸濁液を含む1つの技術を説明します。)固相分離器として。Tween-20(3.75 g/L)は非特異的結合を減少させ、ApoA-IとApoA-I抗体の間の結合親和性を変えることなく、退屈な輝度処置と同じ程度まで、血漿中のApoA-I分子の抗原性部位をマスクしませんでした。スキャッチャード分析によって決定されているとおり(KAは2.83 x 10(8)L/molに合わせて一致します)。縛られていない無吸収の125i標識ApoA-Iを分離するための広く受け入れられている二重抗体免疫沈降技術は、延長されたインキュベーションと遠心分離IgG SORBが、未圧剤125i標識APOA-Iと反応が完全に分離されているため、長期間のインキュベーションと遠心分離IgG SORBが効果的に分離されているため、時間がかかります。10分以内。従来の第2抗体(Y)および固相IgG SORBメソッド(X)によるヒト血漿中のApoA-Iの濃度を比較すると、2つの手法による結果が合理的に同一であることがわかりました(r = 0.98、Y = 1.2x-0.17)。65の正常および5人の高脂血症患者からの血漿中のApoA-Iの平均濃度は、それぞれ1.33(SD 0.32)および0.78(SD 0.35)G/Lであり、ApoA-Iおよび高密度リポタンパク質コレステロールは有意に相関していた(r =0.72、p少ない0.001)。
We describe two techniques for radioimmunoassay of apolipoprotein A-I (apoA-I) in human plasma, each involving use of a non-ionic detergent, Tween-20, to expose antigenic sites, and one involving "IgG SORB" (a suspension of killed staphylococci) as a solid-phase separator. Tween-20 (3.75 g/L) decreased nonspecific binding and unmasked the antigenic sites on the apoA-I molecule in plasma to the same extent as did a tedious delipidation procedure, without altering the binding affinity between apoA-I and apoA-I antibodies as determined by Scatchard analysis (Ka congruent to 2.83 X 10(8) L/mol). The widely accepted double-antibody immunoprecipitation technique for separating bound and unbound 125I-labeled apoA-I is time-consuming, owing to extended periods of incubation and centrifugation IgG SORB effectively separates bound from unbound 125I-labeled apoA-I and the reaction is complete within 10 min. On comparing concentrations of apoA-I in human plasma by the conventional second-antibody (y) and solid-phase IgG SORB methods (x), we found results by the two techniques to be reasonably identical (r = 0.98, y = 1.2x -- 0.17). The mean concentrations of apoA-I in plasma from 65 normal and five hyperlipidemic patients were 1.33 (SD 0.32) and 0.78 (SD 0.35) g/L, respectively, and apoA-I and high-density lipoprotein cholesterol were significantly correlated (r = 0.72, p less than 0.001).
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