培養ヒト内皮細胞のUEA I結合表面糖タンパク質の同定

Ulex Europeaus Agglutinin（UEAI）は、主にヒト組織の内皮細胞に結合します。培養されたヒト臍静脈内皮細胞では、TRITC-UEAIは均一な表面染色を示しましたが、細胞皮材料への結合はありませんでした。細胞の透過化後、UEAIはゴルジ装置を双核構造として装飾しました。レクチンアガロースビーズに結合した35S-メチオニン標識細胞のトリトンX-100溶解物の電気泳動は、同様のポリペプチドのセットがUEA-IおよびWGAによって認識され、明らかに異なるポリペプチドがLCA-アガロースに結合したことを示しました。表面標識により、MR 220 kd、160 kd、140 kd、120 kd、80 kd、50 kdを含む主要な糖タンパク質が明らかになり、そのほとんどはTriton X-100で抽出できました。ただし、140 kd GP、120 kD GP、80 kD GPのみがUEA 140 kd GP、120 kD GP、80 kD GPへの結合を示しました。結果は、培養されたヒト内皮細胞における表面糖タンパク質の異なるセットの中で、UEAIレクチンに結合できるアルファ-L-フコシル部分を持っているのはごく少数であることを示しています。

Ulex europaeus agglutinin (UEAI) binds mainly to endothelial cells in human tissues. In cultured human umbilical vein endothelial cells TRITC-UEAI gave an even surface staining but no binding to pericellular material. After permeabilization of the cells UEAI decorated the Golgi apparatus as a juxtanuclear structure. Electrophoresis of Triton X-100 lysates of 35S-methionine labeled cells bound to lectin agarose beads showed that a similar set of polypeptides was recognized by UEA-I and WGA while distinctly different polypeptides were bound to LcA-agarose. Surface labelling revealed major glycoproteins with Mr 220 kD, 160 kD, 140 kD, 120 kD, 80 kD and 50 kD, most of which could be extracted with Triton X-100. However, only the 140 kD gp, 120 kD gp and 80 kD gp showed binding to UEA 140 kD gp, 120 kD gp and 80 kD gp showed binding to UEA I-lectin. The results show that among a distinct set of surface glycoproteins in cultured human endothelial cells only a few have alpha-l-fucosyl moieties capable of binding to UEAI lectin.