ミュータン連鎖球菌の成長プロトプラストは、ペニシリンによって阻害されません

Streptococcus Mutans BHTの細胞を球形の浸透圧脆弱なプロトプラストに変換できる方法で説明されています。指数相細胞を0.5 Mメレジトースを含む溶液で懸濁し、それらの細胞壁をムタノリシン（M-1酵素）で加水分解しました。得られたプロトプラストが0.5 M NH4Clを含む化学的に定義された成長培地でインキュベートした場合、プロトプラスト懸濁液は濁度、タンパク質、リボ核酸、およびデオキシリボ核酸がバランスのとれた方法で増加しました。ベンジルペニシリン（5マイクログラム/mL）の存在下では、プロトプラストのバランスの取れた成長は、未処理のコントロールと区別できませんでした。ベンジルペニシリンの存在下でのプロトプラスト増殖の阻害がないこの存在は、明らかに抗生物質の不活性化によるものではなかったようです。S. Mutans BHTの指数相細胞を最初に1 mLあたり5マイクログラムのベンジルペニシリンに1時間曝露し、次にプロトプラストに変換した場合、これらのプロトプラストは化学的に定義された浸透圧安定化培地でも成長することができました。比較的高い濃度のベンジルペニシリンの存在下で、リボ核酸とタンパク質を成長させ、合成する壁のないプロトプラストの能力は、以前に報告されたリボ核酸およびタンパク質合成における無傷のストレプトコッチにおける急速な阻害と対照的です。これらのデータは、細胞全体におけるリボ核酸とタンパク質合成のこの二次阻害は、ペプチドグリカン合成の初期段階ではなく、無傷の不溶性細胞壁の継続的なアセンブリに関与する因子に起因することを示唆しています。

A method is described in which cells of Streptococcus mutans BHT can be converted to spherical, osmotically fragile protoplasts. Exponential-phase cells were suspended in a solution containing 0.5 M melezitose, and their cell walls were hydrolyzed with mutanolysin (M-1 enzyme). When the resultant protoplasts were incubated in a chemically defined growth medium containing 0.5 M NH4Cl, the protoplast suspensions increased in turbidity, protein, ribonucleic acid, and deoxyribonucleic acid in a balanced fashion. In the presence of benzylpenicillin (5 microgram/ml), balanced growth of protoplasts was indistinguishable from untreated controls. This absence of inhibition of protoplast growth in the presence of benzylpenicillin was apparently not due to inactivation of the antibiotic. When exponential-phase cells of S. mutans BHT were first exposed to 5 microgram of benzyl-penicillin per ml for 1 h and then converted to protoplasts, these protoplasts were also able to grow in chemically defined, osmotically stabilized medium. The ability of wall-free protoplasts to grow and to synthesize ribonucleic acid and protein in the presence of a relatively high concentration of benzylpenicillin contrasts with the previously reported rapid inhibition of ribonucleic acid and protein synthesis in intact streptococci. These data suggest that this secondary inhibition of ribonucleic acid and protein synthesis in whole cells is due to factors involved with the continued assembly of an intact, insoluble cell wall rather than with earlier stages of peptidoglycan synthesis.