エタノールおよびピラゾールによる阻害により、馬肝臓アルコールデヒドロゲナーゼによるビタミンAアルコールAアルデヒドへの酸化の速度論的および機械的研究

現在の調査では、生理学的に非常に重要なアルコールである全型レチノール（ビタミンAアルコール）が、酵素馬肝臓のデヒドロゲナーゼによって全トランスレチナルデヒドに効率的に酸化されていることが示されています。溶解剤として使用される界面活性剤であるTriton X-100の存在下で、全トランスレチノールの酸化について、145マイクロームのkmレチノール値と0.45S-1の売上高が観察されます。使用された界面活性剤の濃度範囲（最大0.1％Triton X-100）では、エタノールと全型レチノールの酸化に関する研究は、両方の反応の離職率がkmエタノールの値と同様に一定のままであることを示しています。トリトンX-100の濃度が0.025％から0.10％に増加すると、kmレチノール値は2倍に増加します。レチノール酸化のこの挙動は、酵素と界面活性剤間のレチノールの分配に起因する可能性があります。馬肝臓アルコールデヒドロゲナーゼによるアルコール酸化の既知の阻害剤であるピラゾールは、3.3 x 10（-7）mおよび3.9 x 10（-7）mのKI値が観察されたすべてのトランレチノールとエタノールの両方の競合阻害剤であり、それぞれ。また、エタノールは、レチノールとその酸化生成物の生理学的役割を考慮して重要な結果をもたらす可能性のある観察である、完全なトランスレチノール酸化を複雑な方法で阻害することがわかります。私たちの現在の研究は、エタノールと同じ酵素の同じ領域に全型のレチノールが結合し、エタノール自体の効率で酸化されていることを示しています。

The present investigation shows that all-trans retinol (Vitamin A alcohol), an alcohol of great physiological importance, is efficiently oxidized to all-trans retinaldehyde by the enzyme horse liver alcohol dehydrogenase. We observe a Km retinol value of 145 microM and a turnover number of 0.45s-1 for the oxidation of all-trans retinol in the presence of Triton X-100, a surfactant used as a solubilizer. Over the concentration range of surfactant used (up to 0.1% Triton X-100) our studies on the oxidation of ethanol and all-trans retinol show that turnover numbers for both reactions remain constant as does the value for Km ethanol. On increasing the concentration of Triton X-100 from 0.025% to 0.10%, however, the Km retinol value increases by a factor of two. This behavior for retinol oxidation can be attributed to the partitioning of retinol between enzyme and surfactant. Pyrazole, a known inhibitor of alcohol oxidation by horse liver alcohol dehydrogenase, is a competitive inhibitor of both all-trans retinol and ethanol, with observed Ki values of 3.3 X 10(-7) M and 3.9 x 10(-7) M, respectively. We also find that ethanol inhibits all-trans retinol oxidation in a complex fashion, an observation which may have important consequences in view of the physiological role of retinol and its oxidation products. Our present studies indicate that all-trans retinol binds in the same region of the enzyme as does ethanol and is oxidized with an efficiency approaching that of ethanol itself.