Bacillus licheniformis壁における金属結合の主要な部位

Bacillus licheniformis nctc 6346の分離および精製壁は、彼の含まれたペプチドグリカン、テイチョ酸、およびテイチョロン酸（0.36ムモールのジアミノピメリ酸、0.85ムモール、有機リン、および0.43マモールのglucuronic酸あたり0.43マモール[乾燥壁）。壁には、mgあたりの金属の合計0.208ムモールも含まれていました。これらの壁が金属結合条件にさらされた場合（T. J. BeveridgeおよびR. G. E. Murray、J。Bacteriol。127：1502-1518、1976、1976）、バックグラウンドの上の結合金属の量は0.910ムモールのNaの0.031マモールの範囲でした。壁のmgあたりのau。ほとんどは0.500-Mumol Mg-1範囲でした。染色されていない薄いセクションからの電子散乱プロファイルは、金属が壁の布に分散していることを示しました。軽度のアルカリ処理は、壁からテイチョ酸を抽出しました（リンに基づいて97％）が、ペプチドグリカンとテイチョロン酸を無傷のままにしました。この処理は、AU以外のすべての金属の能力を低下させました。薄いセクションは、壁の厚さが3分の1減少したことを明らかにしましたが、金属はまだ壁の布に分散していました。テイチョ酸酸のない壁のトリクロロ酢酸処理により、テイチョロン酸の95％（グルクロン酸に基づく）が除去されましたが、ペプチドグリカンは無傷のままでした（堆積可能なジアミノピメリ酸に基づいています）。これらの壁の厚さはそれほど減少しませんでしたが、結合能力はほとんど残りませんでした（通常、元の結合の10％未満）。Auを伴うこれらの壁の染色により、ペプチドグリカン布内で14.4 nmの反復周波数が生成されました。金属の存在下で抽出されたテイチロン酸を使用した沈降速度実験により、それは強力な金属複合ポリマーであることが確認されました。これらの結果は、テイチョ酸およびテイチョロン酸がB. licheniformis壁の金属結合の最大部位であることを示しています。

Isolated and purified walls of Bacillus licheniformis NCTC 6346 his contained peptidoglycan, teichoic acid, and teichuronic acid (0.36 mumol of diaminopimelic acid, 0.85 mumol of organic phosphorus, and 0.43 mumol of glucuronic acid per mg [dry weight] of walls, respectively). The walls also contained a total of 0.208 mumol of metal per mg. When these walls were subjected to metal-binding conditions (T. J. Beveridge and R. G. E. Murray, J. Bacteriol. 127:1502-1518, 1976) for nine metals, the amount of bound metal above background ranged from 0.910 mumol of Na to 0.031 mumol of Au per mg of walls. Most were in the 0.500-mumol mg-1 range. Electron-scattering profiles from unstained thin sections indicated that the metal was dispersed throughout the wall fabric. Mild alkali treatment extracted teichoic acid from the walls (97% based on phosphorus) but left the peptidoglycan and teichuronic acid intact. This treatment reduced their capacity for all metals but Au. Thin sections revealed that the wall thickness had been reduced by one-third, but metal was still dispersed throughout the wall fabric. Trichloroacetic acid treatment of the teichoic acid-less walls removed 95% of the teichuronic acid (based on glucuronic acid) but left the peptidoglycan intact (based on sedimentable diaminopimelic acid). The thickness of these walls was not further reduced, but little binding capacity remained (usually less than 10% of the original binding). The staining of these walls with Au produced a 14.4-nm repeat frequency within the peptidoglycan fabric. Sedimentation velocity experiments with the extracted teichuronic acid in the presence of metal confirmed it to be a potent metal-complexing polymer. These results indicated that teichoic and teichuronic acids are the prime sites of metal binding in B. licheniformis walls.