磁気活性化細胞ソーター（MACS）によるヒト末梢血からのCD4+およびCD19+リンパ球集団の急速な分離

ヒトリンパ球の亜集団の迅速な精製は、さまざまな疾患状態での相互作用や寄与を解明するための不可欠なステップです。磁気活性化セルソーター（MACS）を使用した細胞精製は、迅速で高度に精製された細胞集団を生成することが示されている比較的新しい技術です。このレポートでは、MACSを使用した単純なワンステップポジティブ選択方法の両方を、PBMCからのヒトCD4+またはCD19+リンパ球のいずれかを精製し、CD4+およびCD19+細胞集団の両方の連続分離を説明しています。これらの方法は、CD4 + T細胞で97 +/- 3％を超える収量で約4時間で細胞集団を分離し、CD19 + B細胞で92 +/- 5％を分離できます。機能研究では、精製されたCD19+ B細胞は、10日間のB細胞刺激アッセイのCD19細胞画分よりも、それぞれ13倍および24倍のIgMおよびIgGとIgGを分泌しました。2つの細胞タイプの精製は、増殖によって示されるように有意な活性化を引き起こしませんでした。しかし、両方の細胞タイプは、インターロイキン-2で刺激すると増殖することができました。

Rapid purification of human lymphocyte subpopulations is an essential step in order to elucidate their interactions and/or contributions in various disease states. Cell purification using a Magnetic Activated Cell Sorter (MACS) is a relatively new technology which has been shown to be rapid and yield highly purified populations of cells. This report describes both a simple one-step positive selection method using the MACS to purify either human CD4+ or CD19+ lymphocytes from PBMC and a sequential separation of both CD4+ and CD19+ cell populations. These methods can separate the cell populations in approximately 4 h with yields > 90% and purity of 97 +/- 3% for CD4+ T cells and 92 +/- 5% for CD19+ B cells. In functional studies, purified CD19+ B cells secreted 13- and 24-fold more IgM and IgG, respectively, than the CD19- cell fraction in 10 day B cell stimulation assays. Purification of the two cell types did not cause any significant activation as shown by proliferation. Both cell types, however, were able to proliferate upon stimulation with interleukin-2.