反応性酸素種は、検出可能なアップレギュレーションなしで好中球に結合する内皮ICAM-1能力を急速に増加させる

ホルボール12-ミリステート13-アセテート（PMA）およびトロンビンの効果と、ヒト臍帯静脈の粘着特性に対するヒポキサンチン（HX） - Xanthineオキシダーゼ（XO）によって生成された反応性酸素種（ROS）の効果を比較しました。内皮細胞（HUVEC）から安静時多形核好中球（PMN）。HX-XO処理HUVECのPMN順守は、すぐに2時間と2時間後に、未処理のHUVECに対して約2倍に2.5倍増加しました。HUVECのPMAまたはトロンビン刺激によって誘導されたものに加えていませんでした。ROS誘導順守は、BN52021（PAF受容体拮抗薬）によって拮抗されていないか、抗P-セレクチンモノクローナル抗体（MOAB）によって阻害されないため、血小板活性化因子（PAF）またはP-セレクチンの発現によるものではありませんでした。PMAおよびトロンビン刺激HUVECの接着の増加。マンノース-6-pまたはn-アセチルネーラミン酸（シアル酸）でプレインキュベートしたPMNは、マンノースまたはガラクトース-6-pではなく、ROS処理HUVECへの遵守の減少を示し、炭水化物分子が終末で発現し、炭水化物分子が発現し、それを提供することを示唆しています。PMN L-セレクチンのリガンド。この遵守は抗ICAM-1、抗CD11A、抗CD11B、抗CD11Aによって阻害されたため、安静時HUVECの表面に構成的に存在する細胞間接着分子（ICAM-1）がROS処理HUVECのPMN遵守に関与しました。および抗CD18モアブ。これらのMOABの効果は相加的ではないため、非CD18非ICAM-1依存性メカニズムもこの順守に関与しています。さらに、マンノース-6-Pとシアル酸との抗CD18と抗ICAM-1 MOABの組み合わせは、PMNアドヒアランスを完全に阻害しました。ここで観察されたPMNのHX-XO暴露HUVECへの結合の増加は、IC-AM-1に関係していましたが、そのアップレギュレーションと別の非ICAM-1依存性メカニズムとは無関係でした。PMN。

We compared the effects of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and thrombin with those of nonlytic concentrations of reactive oxygen species (ROS) generated by hypoxanthine (HX)-xanthine oxidase (XO) on the adhesion properties of human umbilical cord vein endothelial cells (HUVEC) to resting polymorphonuclear neutrophils (PMN). PMN adherence to HX-XO-treated HUVEC was increased approximately twofold to 2.5-fold relative to untreated HUVEC, both immediately and after 2 hours. It was not additive to that induced by PMA or thrombin stimulation of HUVEC. ROS-induced adherence was not due to platelet-activating factor (PAF) or P-selectin expression, as it was neither antagonized by BN52021 (PAF receptor antagonist) nor inhibited by anti-P-selectin monoclonal antibody (MoAb), contrary to the increased adhesion of PMA- and thrombin-stimulated HUVEC. PMN preincubated with mannose-6-P or N-acetylneuraminic acid (sialic acid), but not mannose or galactose-6-P, showed reduced adherence to ROS-treated HUVEC, suggesting that carbohydrate molecules were expressed on the latter and served as the ligand for the PMN L-selectin. Intercellular adhesion molecule (ICAM-1), constitutively present on the surface of resting HUVEC, was involved in the PMN adherence to ROS-treated HUVEC, since this adherence was inhibited by anti-ICAM-1, anti-CD11a, anti-CD11b, and anti-CD18 MoAbs. A non-CD18, non-ICAM-1-dependent mechanism is also involved in this adherence, since effects of these MoAbs were not additive; moreover, combinations of anti-CD18 and anti-ICAM-1 MoAbs with mannose-6-P and sialic acid completely inhibited PMN adherence. The increased binding of PMN to HX-XO-exposed HUVEC observed here involved IC-AM-1, but was independent of its upregulation, and another non-ICAM-1-dependent mechanism, in which carbohydrates expressed on HUVEC recognize L-selectin on PMN.