C6BU-1神経膠腫細胞の代謝性グルタミン酸受容体には、NMDA受容体型複合体のような特性があり、セロトニン2受容体刺激シグナル伝達と相互作用します

培養神経膠腫（C6BU-1）細胞では、グルタミン酸、N-メチル-D-アスパラギン酸（NMDA）、アスパラギン酸、メタボトロピックグルタミン酸受容体アゴニストトランスなどの興奮性アミノ酸（EAA）が発見されました。細胞外Mg2+およびCa2+がない場合の細胞内Ca2+濃度（[Ca2+] I）。百日咳毒素治療により、このグルタミン酸誘発性[Ca2+] Iが増加しました。Mg2+、D-2-Amino-5-ホスホノバレレート（D-APV）、HA-966、およびMK-801などのNMDA受容体チャネル複合体に対するさまざまな拮抗薬も、グルタミン酸によって誘導される[Ca2+] Iの増加を阻害しました。これらの結果は、C6BU-1神経膠腫細胞における毒素感受性GTP結合タンパク質とホスホリパーゼC系がNMDA受容体イオンチャネル複合体の薬理学的特性を持っていることを百日咳毒素感受性GTP結合タンパク質とホスホリパーゼC系に結合したこれらの代謝性EAA受容体がまた、Mg2+の存在下で、これらの代謝性受容体は、5-ヒドロキシトリプタミン2（5-HT2）受​​容体シグナル伝達と相互作用したNMDA受容体チャネル複合体に似ていることがわかりました。EAASは、5-HT2受容体を介した細胞内Ca2+動員とイノシトール1,4,5-三リン酸形成を濃度依存的に阻害しました。グルタミン酸の阻害効果は、さまざまなNMDA受容体拮抗薬によって逆転しました（D-APV、MK-801、Phencyclidine、およびHA-966）が、L-APVはグルタミン酸の阻害効果をブロックできませんでした。同じ結果が細胞外Ca2+の非存在下で観察されました。さらに、5-HT2受容体を介したシグナル伝達に対するこの阻害効果は、C6BU-1細胞を百日咳毒素で処理することにより廃止されましたが、5-HT2受容体媒介[Ca2+] Iの増加は、百日咳毒素処理によって廃止されませんでした。したがって、グルタミン酸の阻害効果は、イオンチャネルを介したCa2+の流入の結果ではなく、代謝性グルタミン酸受容体を介して動作し、NMDA受容体チャネル錯体様特性を有すると結論付け、毒素依存性GTPバインディングプロタインおよびホスホリパーゼC.

We found in cultured glioma (C6BU-1) cells that excitatory amino acids (EAAs) such as glutamate, N-methyl-D-aspartate (NMDA), aspartate, and metabotropic glutamate receptor agonist trans-(+/-)-1-amino-1,3-cyclopentanedicarboxylate caused an increase in the inositol 1,4,5-trisphosphate formation and the intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) in the absence of extracellular Mg2+ and Ca2+. Pertussis toxin treatment abolished this glutamate-induced [Ca2+]i increase. Various antagonists against NMDA receptor-ion channel complex, such as Mg2+, D-2-amino-5-phosphonovalerate (D-APV), HA-966, and MK-801, also inhibited the increase in [Ca2+]i induced by glutamate. These results indicate that these metabotropic EAA receptors coupled to pertussis toxin-susceptible GTP-binding protein and phospholipase C system in C6BU-1 glioma cells have the pharmacological properties of NMDA receptor-ion channel complexes. We also found that in the presence of Mg2+ these metabotropic receptors resemble the NMDA receptor-ion channel complex interacted with 5-hydroxytryptamine2 (5-HT2) receptor signaling. EAAs inhibited 5-HT2 receptor-mediated intracellular Ca2+ mobilization and inositol 1,4,5-trisphosphate formation in a concentration-dependent manner. The inhibitory effect of glutamate was reversed by various NMDA receptor antagonists (D-APV, MK-801, phencyclidine, and HA-966), but L-APV failed to block the inhibitory effect of glutamate. The same result was observed in the absence of extracellular Ca2+. In addition, this inhibitory effect on 5-HT2 receptor-mediated signal transduction was abolished by treatment of C6BU-1 cells with pertussis toxin, whereas 5-HT2 receptor-mediated [Ca2+]i increase was not abolished by pertussis toxin treatment. We can, therefore, conclude that the inhibitory effect of glutamate is not a result of the influx of Ca2+ through the ion channel and that it operates via metabotropic glutamate receptors, having NMDA receptor-ion channel complex-like properties and being coupled with pertussis toxin-sensitive GTP-binding protein and phospholipase C.