ヒト星状細胞腫細胞株（U-373 mg）における物質Pによる細胞内カルシウムの動員

細胞内遊離カルシウム濃度（Delta [Ca2+] I）の変動は、Fura-2アセトキシメチルエステルを搭載した無傷および分離ヒト星細胞腫細胞（U373 mg）で測定しました。50 nm物質P（SP）の微量灌流は1秒間適用され、26 nmの[Ca2+] Iの安定した基底レベルから[Ca2+] Iを351 nm増加させました。SPによって誘導されたピークデルタ[Ca2+] Iは、10（-3）nmのしきい値、1.3 nmのED50、SPの濃度の最大効果で100 nmを超える最大効果を持つ用量依存性でした。NK1受容体アゴニスト[SAR9MET（O2）11] SPはSPの効果を模倣し、NK2およびNK3選択的受容体アゴニスト、[N1（10）] NKA（4-10）およびSenktideはそれぞれ効果がありませんでした。SPによって誘発されたDelta [Ca2+] Iは、100ミクロムカドミウムまたは細胞外カルシウムイオンの除去によって影響を受けませんでした。最大30 mmのカフェインは[Ca2+] iに影響を与えませんでした。対照的に、Thapsigarginは安静を増加させ、[Ca2+] Iは92 nm増加し、sp。百日咳処理（500 ng/ml-24 h）は、sp。NK1受容体に作用するSPは、タプシガルギンによって部分的に枯渇できる細胞内カルシウムプールからサイトゾルカルシウムを動員すると結論付けています。

Variations in intracellular free calcium concentration (delta[Ca2+]i) were measured in intact and isolated human astrocytoma cells (U373 MG) loaded with fura-2 acetoxymethylester. Microperfusion of 50 nM substance P (SP), applied for 1 s, increased [Ca2+]i by 351 nM from a stable basal level of [Ca2+]i of 26 nM. The peak delta[Ca2+]i induced by SP was dose dependent with a threshold of 10(-3) nM, an ED50 of 1.3 nM and a maximal effect for concentrations of SP greater than 100 nM. The NK1 receptor agonist, [Sar9Met(O2)11]SP, mimicked the effect of SP, while the NK2 and NK3 selective receptor agonists, [N1(10)]NKA(4-10) and senktide, respectively, had no effect. The delta[Ca2+]i induced by SP was unaffected by 100 microM cadmium or by removal of extracellular calcium ions. Caffeine up to 30 mM had no effect on [Ca2+]i. In contrast, thapsigargin increased resting [Ca2+]i by 92 nM and reduced the delta[Ca2+]i induced by SP. A pertussis treatment (500 ng/ml-24 h) did not modify the delta[Ca2+]i induced by SP. We conclude that SP, acting on a NK1 receptor, mobilizes cytosolic calcium from an intracellular calcium pool which can be partially depleted by thapsigargin.