YOPRO-1は、細胞生存率を妨げることなく、プログラムされた細胞死（アポトーシス）のサイトフルオロメトリック分析を許可します

細胞透過化がない場合、核染色ヨプロ-1の不浸透性は、細胞質量測定または蛍光顕微鏡を使用したアポトーシスの正確な分析を許可します。デキサメタゾン処理胸腺細胞、照射された末梢血単核細胞、および成長因子が枯渇した腫瘍B細胞株など、いくつかの免疫細胞集団が研究されました。細胞質量測定を使用したアクリジンオレンジと、光学顕微鏡を使用したエオシンヘマトキシリンでは、優れた相関値が見つかりました。蛍光顕微鏡では、ヨプロ-1蛍光細胞は、核収縮や断片化などのアポトーシスを受けている細胞の形態学的特徴を示しています。アポトーシスの検出に以前に使用されていた他のすべての核色素とは異なる色素の重要な特徴は、生細胞にラベル付けされていないことです。フローサイトフルオロメトリー分析後の細胞ソートにより、アポトーシス細胞集団のみがYoPro-1で標識されたことが確認されました。さらなる研究により、Hoechst 33342との生細胞のインキュベーションは、いくつかの刺激に応じて増殖するT細胞の能力をほぼ完全に廃止したが、Yopro-1には阻害効果がなかったことが示された。この新しいシンプルで迅速かつ再現可能なYopro-1染料の使用は、アポトーシス細胞の分析と、アポトーシス細胞を含む培養における生細胞の機能的特性の調査に役立つはずです。

In the absence of cell permeabilization, the impermeant nuclear dye YOPRO-1 permits accurate analysis of apoptosis using cytofluorometry or fluorescent microscopy. Several immune cell populations were studied including dexamethasone-treated thymocytes, irradiated peripheral blood mononuclear cells and a growth factor-depleted tumor B cell line. Excellent correlation values were found with acridine orange using cytofluorometry and with eosin-hematoxylin using optical microscopy. Under fluorescent microscopy, YOPRO-1-fluorescent cells demonstrate the morphological features of cells undergoing apoptosis such as nuclear shrinkage and fragmentation. An important characteristic of the dye that differs from all other nuclear dyes previously used for the detection of apoptosis is that it does not label living cells. Cell sorting after flow cytofluorometry analysis confirmed that only the apoptotic cell population was labelled with YOPRO-1. Further studies showed that while incubation of living cells with Hoechst 33342 almost completely abrogated the capacity of T cells to proliferate in response to several stimuli, YOPRO-1 had no inhibitory effect. This new simple, rapid and reproducible use of the YOPRO-1 dye should prove useful in the analysis of apoptotic cells as well as for investigations of the functional properties of living cells in a culture containing apoptotic cells.