アニオン分泌は、培養されたヒト多嚢胞細胞の単層によって液体分泌を促進します

私たちは、活性アニオン輸送が、常染色体優性多嚢胞性腎疾患（ADPKD）における嚢胞性上皮による液体分泌を促進するという仮説を調査しました。ADPKD患者から除去された嚢胞組織に由来する一次培養物の単層を準備しました。単層は浸透性の支持で栽培され、液体分泌はフォルスコリンによって開始されました。結果は、Cl-を分泌することが知られているMadin-Darby犬腎臓（MDCK）細胞の単層で得られた結果と比較されました。アゴニストが存在しない場合、ADPKD単層は液体を吸収しました（0.20 +/- 0.02 Microliter.cm Surface Araig-2.H-1）。Forskolinはこれを分泌（0.60 +/- 0.03 Microliter.cm-2.H-1）に逆転させました。コントロールMDCK単層は、どちらの方向にも液体を輸送しませんでしたが、フォルスコリン誘発分泌（0.48 +/- 0.03マイクロリットル.cm-2.h-1）。単層の電気特性は、USSINGチャンバーで監視されました。Forskolinは、ADPKD単層（-0.9 +/- 0.1から-1.1 +/- 0.1 mV）のトランセピセリール電位差（VTE）と短絡電流（ISC）（6.6 +/- 0.7〜9.2 +/- 0.8 Microaを増加させました。/cm2）。Transepithelial抵抗（RTE）が落ちた（156 +/- 9〜138 +/- 10 OMEGA.CM2）。MDCK単層でも同様の結果が得られました。VTEの極性とISCの方向は、陰イオンの活性分泌が液体分泌を駆動するという仮説と互換性があります。Na-K-2Cl共輸送体であるブメタニドの基底外側適用は、ADPKD単層（0.56 +/- 0.05から0.05〜0.05〜0.28 +/- 0.03）、脱分極VTE、およびRTEに影響を与えることなく阻害されたISCによるフォルスコリン刺激液分泌を減少させました。Cl-チャネルブロッカーであるジフェニルアミン-2-カルボン酸の頂端散布も、ADPKD単層（0.65 +/- 0.03から0.27 +/- 0.02 Microliter.cm-2.H-1）による液体分泌を阻害しました（250で250で切り捨てられた抽象化言葉））

We have investigated the hypothesis that active anion transport drives fluid secretion by the cystic epithelium in autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD). We prepared monolayers of a primary culture derived from cystic tissue removed from ADPKD patients. The monolayers were grown on permeant supports, and fluid secretion was initiated by forskolin. The results were compared with those obtained with monolayers of Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells, known to secrete Cl-. In the absence of the agonist, ADPKD monolayers absorbed fluid (0.20 +/- 0.02 microliter.cm surface area-2.h-1). Forskolin reversed this to secretion (0.60 +/- 0.03 microliter.cm-2.h-1). Control MDCK monolayers did not transport fluid in either direction, but forskolin induced secretion (0.48 +/- 0.03 microliter.cm-2.h-1). The electrical properties of the monolayers were monitored in Ussing chambers. Forskolin increased the transepithelial potential difference (Vte) of ADPKD monolayers (-0.9 +/- 0.1 to -1.1 +/- 0.1 mV) and the short-circuit current (Isc) (6.6 +/- 0.7 to 9.2 +/- 0.8 microA/cm2). The transepithelial resistance (Rte) fell (156 +/- 9 to 138 +/- 10 omega.cm2). Similar results were obtained with MDCK monolayers. The polarity of Vte and the direction of the Isc are compatible with the hypothesis that active secretion of anion drives fluid secretion. Basolateral application of the Na-K-2Cl cotransporter, bumetanide, reduced forskolin-stimulated fluid secretion by ADPKD monolayers (0.56 +/- 0.05 to 0.28 +/- 0.03), depolarized Vte, and inhibited Isc without affecting Rte. Apical application of the Cl- channel blocker, diphenylamine-2-carboxylate, also inhibited fluid secretion by ADPKD monolayers (0.65 +/- 0.03 to 0.27 +/- 0.02 microliter.cm-2.h-1).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)